前言 自1983年Frimberge首先报道使用金属内支架治疗食管狭窄取得成功以来，金属内支架以其操作简单，危险性小，成功率高，价格相对便宜而广泛应用于治疗食管狭窄。 对于位置较高的食管狭窄，置入支架的最高点并未形成明确的观点，未见有关高位食管支架的安全性的动物实验研究的有关报道。 国内外研究发现，在组织损伤修复过程中，局部有大量的巨噬细胞、T细胞、肥大细胞浸润，并表达出相关的致纤维化细胞因子。食管支架置入后食管局部的损伤与修复，其调控机制与一般的损伤与修复也可能存在一些相似性。 本研究通过在动物颈部食管置入支架，观察支架置入后动物的反应，旨在分析支架对呼吸、吞咽等功能的影响，探讨高位食管置入支架的安全性，为进一步的临床应用做准备。并于支架局部食管取材，采用免疫组化的方法探讨支架置入后早期肿瘤坏死因子α(TNF-α)在食管局部表达的机制。 材料与方法 一 实验对象与分组 成年健康犬11只，对照组2只，不放置支架，实验组共9只，随机分为三组，每组3只，于置入支架后第三、五、七天处死。 二 材料与仪器 支架与推送器、SHIMADZU DIGITEX(a)2400 DSA机、PHILIPS MX8000多层CT、TNF-α免疫组化试剂盒及其它仪器与药品。 三实验步骤 互术前准备术前12小时实验动物禁食水。 2麻醉与固定硫喷妥钠门0mg／kg）腹腔麻醉，仰卧位固定安放牙垫。 3支架放置透视监视下经口置人支架。支架上缘距声门0．5叫。支架远端丝线固定。正侧位摄片记录。 4 CT扫描后行多平面重建及三维重建。 5实验动物饲养观察第一天禁食水，第二天开始流食。 6实验动物取材三组动物分别于置人支架后第33＊天处死。肉眼观察食管外壁与食管粘膜变化。在支架上缘、中央、下缘处食管的腹侧、背侧分别取材，对照组取材部位同实验组。10％中性福尔马林固定。 7切片制作与染色标本经脱水、透明、浸蜡后制成石蜡包块，每个标本切片5张。HE染色后显微镜下观察。 8检测TNF—a表达石蜡切片脱蜡、水化，检测TNF—a步骤按说明书进行。最后DAB显色，苏木素复染，中性树胶封片。 四结果判定标准 TNF－a阳性细胞为胞浆染色。在光镜下观察切片，平均估算着色细胞所占的百分率，分级标准：阳性细胞＞50％为＋＋，＜50％为＼无着色为－。 五统计学处理 使用SPSS10．0统计软件包。TNF－a表达与时间、位置的关系采用 X‘检验。两两比较采用 X’检验的分割方法。以 P＜0．05为有统计学差异。 结 果 支架置人后平片可以清楚显示支架位置及支架上缘与声门关系。CT平扫及重建发现气管、喉没有受压、受推移的表现。发现 ·二·l只呕吐，2只轻微呛咳伴吞咽增多，5只吞咽动作增多，所有变化2－5天后消失。所有实验动物呼吸顺畅，发音清楚，饮食正常，无窒息、返流至鼻腔等。 实验组发现支架处食管外壁充血；第一组、第二组发现粘膜表面充血、渗出，无坏死、溃疡；第三组食管粘膜面充血，并可见粘膜点状出血，没有发现坏死、溃疡、穿孔等。光镜下第一组可见粘膜下层水肿，小动脉迂曲扩张，炎细胞浸润；第二组粘膜下层水肿减轻；第三组粘膜上皮增厚，粘膜下层水肿消失，炎细胞明显增多，粘膜下层增厚，腺体萎缩。 短期内胞浆中就发现有大量＊＊F－a表达（P＜O．005厂而且7天后显著增多汗＜0．05人食管腹侧与背侧组织中的＊＊F－a的表达没有统计学差异瞩＞0．刀5八支架边缘与支架中央食管组织中的＊＊F－a表达没有统计学差异（P＞O．05）。 结 论 短期内高位食管支架（上缘距声门距离0 5－Icm）安全可行，无喉头水肿、呼吸困难等症状。但支架长期放置的效果还需要进一步观察研究。 由于支架对食管壁的损伤，早期即可发现大量TNF－a表达，但TNF－a．表达与位置无关。