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目的:观察阿奇霉素、青蒿琥酯、乙酰螺旋霉素及配伍用药体内外抗弓形虫作用的效果,探索治疗弓形虫病的有效药物及方法,为临床合理用药提供科学的指导。方法:体外试验:制取RH株弓形虫速殖子腹水悬液,定量分装到无菌细胞培养板内,平均约2.5×10~4个虫体/孔,以生理盐水作空白对照组,不同浓度的阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯、阿奇霉素与乙酰螺旋霉素、阿奇霉素与青蒿琥酯以及乙酰螺旋霉素与青蒿琥酯配伍用药为实验组;用形态学观察、细胞计数法和MTT(四甲基偶氮噻唑蓝)比色法测定各组药物对体外弓形虫的抑制和杀灭作用,分别计算相对抑制率,绘出药物剂量效应曲线。体内试验:建立小鼠急性弓形虫病动物模型;以单纯药物阿奇霉素(A组)、乙酰螺旋霉素(B组)和青蒿琥酯(C组),配伍药物阿奇霉素与青蒿琥酯(D组),阿奇霉素与乙酰螺旋霉素(E组)以及青蒿琥酯与乙酰螺旋霉素(F组)作为治疗实验组,同时设未治疗模型为对照组(G组)。上述各治疗组分别于感染后2h给药,均首剂量加倍, 1次/天,连用7天。给药后每天记录各组实验小鼠的饮食、活动及发病情况、死亡时间和死亡数,镜检死亡小鼠腹腔冲洗液弓形虫体的形态与密度,比较观察各组实验动物的存活天数,绘制小鼠的生存曲线。实验组(阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯、阿奇霉素与乙酰螺旋霉素、阿奇霉素与青蒿琥酯以及乙酰螺旋霉素与青蒿琥酯配伍用药)虫体形态结构发生了明显变化,纳虫泡数目较少;而空白对照组虫体无明显改变,纳虫泡可见。(2)体外药敏实验:药物作用24h后,当阿奇霉素浓度为0.2ug/mL及200ug/mL时,相对抑制率是35.7﹪和68.8﹪,乙酰螺旋霉素浓度为0.2ug /mL及200ug/mL时,相对抑制率仅仅为2.56﹪和8.25﹪,青蒿琥酯浓度为2.5ug/mL及2500ug/ mL时,相对抑制率则为7.7﹪和51.0﹪;而乙酰螺旋霉素+青蒿琥酯配伍用药浓度为2ug/mL+2.5ug/mL及2000ug/mL+ 2500ug/mL时,相对抑制率分别是7.3﹪和46.3﹪。药物剂量效应曲线显示,单纯药物及配伍用药对虫体的抑制作用,均随着药物浓度的逐渐加大而越来越强,其作用效果与药物浓度呈正相关关系。体内实验:给药后3天内,各实验组及对照组小鼠均无明显的异常表现,第4天,对照组(G组)和乙酰螺旋霉素治疗组(B组)、乙酰螺旋霉素与青蒿琥酯配伍用药治疗组(F组)小鼠开始出现活动度减弱、畏寒、嗜睡、毛发散乱等现象,并在第5天小鼠开始死亡。第6天,阿奇霉素与乙酰螺旋霉素配伍用药治疗组(E组)、青蒿琥酯治疗组(C组)小鼠开始死亡。第7天,阿奇霉素治疗组(A组)、阿奇霉素和青蒿琥酯配伍用药治疗组(D组)小鼠开始死亡;而对照组(G组)小鼠第9天的时候全部死亡。乙酰螺旋霉素治疗组(B组)最长存活时间为8天,其它各组小鼠从第4天至第7天出现轻微症状,第8天后逐渐明显,最长存活天数为15天(见表8)。应用Log-rank统计分析,各实验组与对照组存活天数相比,差异显著,有统计学意义(p<0.05)。结论阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及配伍用药对体内外弓形虫均有抗虫效应,其体外抗虫效果与药物浓度呈正相关关系,给药治疗后能明显提高受染实验动物的存活天数。在常规治疗量药物浓度下,对弓形虫的杀灭作用依次为阿奇霉素、阿奇霉素与青蒿琥酯配伍用药、青蒿琥酯、阿奇霉素与乙酰螺旋霉素配伍用药,乙酰螺旋霉素与青蒿琥酯配伍用药,而乙酰螺旋霉素的效果最差。阿奇霉素、阿奇霉素与青蒿琥酯配伍联用有望成为临床上治疗弓形虫病的较佳侯选用药。探索建立了稳定的弓形虫MTT体外药敏实验方法,为筛选和评价抗弓形虫药物提供较理想的研究平台。