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背景：缺血性脑血管疾病已成为现代社会危害人类生命与健康最重要的疾病之一，由于它发病急及神经元的难分裂性，临床治疗效果还不理想，仍然需要研究新的治疗方法。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)具有促进血管内皮细胞迁移、增殖和新生血管的作用，同时还有一定的神经保护作用。促血管生成的生长因子治疗缺血性疾病在动物模型和临床实验方面，国内外都开展了不少工作。HGF在基因治疗肢体缺血和心肌缺血方面取得了显著的疗效，但应用腺病毒载体介导肝细胞生长因子对大脑缺血的治疗还未见报道。 方法和结果：利用293细胞内质粒同源重组的方法，构建了携带人HGF基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad-HGF，并通过感染NIH3T3细胞证明它具有感染活性和表达活性。携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的重组腺病毒Ad-GFP感染原代培养的乳大鼠皮层神经元的实验表明，腺病毒对神经元有较高的转染率，而且毒性较低。转染Ad-HGF的神经元表达分泌HGF，并且对无血清培养的神经细胞有一定的保护作用。在建立大鼠大脑局灶性缺血模型的基础上，探讨了大脑侧室注射Ad-GFP后，GFP基因在体内的表达范围、表达周期以及Ad-HGF对脑缺血的治疗效果。大鼠脑冰冻切片显示绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)只在双侧大脑侧室中表达，大脑其它部位及其它器官均无分布。注射第3d荧光最强，第7d减弱，第14d消失。用ELISA方法和免疫组化方法分别在第3、7、14d检测了大鼠血清、大脑匀浆和主要脏器中的HGF水平，均未发现转染Ad-HGF组和对照组之间的差异，说明腺病毒载体在大脑局部使用是相对安全的，不会造成全身性的影响。大鼠大脑经TTC方法染色后显示，Ad-HGF治疗组缺血区明显小于非治疗组；石蜡切片作HE染色后显示，Ad-HGF治疗组缺血区比对照组缺血区血管密度显著增大。用基因芯片技术比较了缺血及Ad-HGF治疗对大鼠大脑基因表达谱的影响，缺血引起缺血部位基因表达改变以上调为主，57个基因表达上调，5个基因表达下调；而Ad-HGF治疗后的上调基因与下调基因接近，43个基因表达降低，32个基因表达升高。 结论：以上结果说明，向大脑侧室内局部注射携带HGF基因的腺病毒载体治疗脑缺血是有效的和相对安全的，为临床应用提供了重要的理论依据。