背景：乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus)感染是全球范围内影响人类健康的重要问题,目前人们对HBV及其所致疾病有了相当深入的认识,小鼠作为一种实验室常用的动物,遗传免疫背景清楚明确,已经成为人们研究乙肝的重要工具,但如何稳定高表达HBV转基因小鼠,怎样将其用于研究乙型肝炎及抗HBV药物筛选等,仍属待探讨的领域。通过构建、筛选出高表达的HBV质粒,并通过原核显微注射等方法建成了较为理想的稳定、高表达HBV转基因小鼠模型,解决了长期困扰乙型肝炎研究中缺乏理想动物模型的难题。从HBV转基因小鼠T细胞免疫状态,树突状细胞提呈功能等多方面初步阐明HBV转基因小鼠免疫耐受状态。对HBV转基因鼠相关的乙肝病毒指标和17项血液生化指标进行检测分析,以全面了解转基因鼠乙肝病毒基因鼠的复制表达、免疫耐受状态、肝功、血糖及血脂代谢状态；为探讨乙肝发病机制和抗乙肝新药物评价提供可靠参考依据。　　 目的：⑴研究乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠的免疫耐受和血液生理生化指标特性。⑵为探讨乙肝发病机制和抗乙肝新药物评价提供可靠参考依据。　　 方法：①对HBV转基因鼠相关的乙肝病毒指标进行检测分析,以全面了解转基因鼠乙肝病毒基因的复制表达、免疫耐受状态。②应用流式细胞仪、T淋巴细胞增殖、Elispot和ELISA等免疫检测方法分别对转基因鼠脾树突状细胞(DC)的Toll样受体TLR2、TLR9、T淋巴细胞增殖、T细胞分泌IFN-γ斑点检测、4项相关细胞因子等进行定量检测,以便从DC、T细胞水平、细胞因子及肝组织等多方面研究转基因鼠对HBV的免疫耐受特性。③通过肝免疫组化及HE染色还检测不同时期转基因鼠肝HBsAg表达和病理变化,并了解转基因鼠HBsAg表达起始时间及肝组织病理变化。④对HBV转基因鼠的17项血液生化指标进行检测分析,以全面了解转基因鼠的肝功、血糖及血脂代谢状态。　　 结果：⑴已建立的传代稳定的HBV转基因小鼠Balb/c-TgN(HBVayw1.3)品系,可复制表达乙肝HBsAg、preS1、HBeAg、HBcAg和HBV DNA等多项指标而Anti—HBs、Anti-HBc、Anti-HBe阴性。⑵HBsAg刺激T淋巴细胞增生,结果表明转基因鼠淋巴细胞的增生能力显著低于非转基因鼠。⑶经Elispot法检测鼠脾细胞悬液经HBsAg刺激后,转基因鼠脾的IFN-γ+T细胞斑点数明显低于正常对照组(P<0.05),表明HBV转基因小鼠机体对乙肝病毒免疫在T细胞水平存在应答状态低下。⑷本研究对鼠CD11c+脾DC的TLR2、TLR9测定表明,HBV转基因小鼠与正常鼠在上述二指标上未发现异常,这说明HBV转基因小鼠自身除对HBV病毒存在免疫耐受外,其天然和获得性免疫功能是正常的。⑸HBV转基因鼠血液生化指标检测表明其肝功能无明显改变。⑹在18日龄胎鼠肝组织可观察到HBsAg表达,肝组织无明显病理变化。　　 结论：①本HBV转基因鼠有乙肝病毒相关抗原表达而相应抗体为阴性,无明显肝组织病理改变,即呈免疫耐受状态,并且仅对HBV病毒相关抗原存在这种免疫耐受,其先天和获得性免疫功能均正常,类似于人类慢性HBV无症状携带者的免疫耐受。②表明该转基因小鼠是比较理想的复制型HBV转基因小鼠模型。