EP受体在丙泊酚注射血管性疼痛中的研究以及mGluR5拮抗剂的干预作用

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目的:观察丙泊酚注射血管性疼痛引起的屈肌反射肌电图变化、脊髓EP受体各亚型蛋白及mRNA表达的变化,以及mGluR5拮抗剂MPEP对屈肌反射肌电图变化、脊髓EP受体各亚型蛋白及mRNA表达的影响。  方法:雄性SD大鼠24只,8~12周,体重为280~340g,根据随机数字表随机分为4组(生理盐水组,丙泊酚组,MPEP预处理+生理盐水组,MPEP预处理+丙泊酚组),每组6只。尿烷腹膜下注射麻醉,股静脉下约1cm切口采用肝素化的聚乙烯导管加热至合适形状后,从股静脉插入。生理盐水组直接泵入生理盐水,丙泊酚泵入1%丙泊酚注射液, MPEP预处理+生理盐水组与MPEP预处理+丙泊酚组预先腹膜下注射MPEP(20mg/kg)15min后,分别泵入生理盐水和1%丙泊酚注射液,泵入速度均为0.4ml min-1,两组均予在泵注30s、1min,2min时间点用23G针电极检测右侧后股二头肌和半腱肌的肌电图,对每次肌电图进行记录,并对记录波形放大后利用波形描记器器和波形图像分析软件进行分析。肌电图检测后,断颈处死两组动物后取腰椎膨隆处脊髓,样品处理后使用WB检测EP1,EP2,EP3,EP4受体蛋白表达情况;并切取新鲜组织提取RNA,采用RT-PCR检测EP1,EP2,EP3,EP4受体的mRNA表达情况。  结果:丙泊酚组的反射阈值(3.24±0.12V)较生理盐水组的反射阙值(4.23±0.15V)有显著降低(P<0.05)及丙泊酚组的反射潜伏期(65.23±2.29ms)较生理盐水组(85.23±3.24ms)有明显缩短(P<0.05);丙泊酚组腰髓段EP受体亚型EP2(0.281±0.031)和EP4(1.187±0.024)受体含量较生理盐水组的腰髓段EP受体亚型EP2(0.181±0.013)和EP4(0.279±0.113)受体含量明显增强(P<0.05),且两者的mRNA表达明显上升(P<0.05),与丙泊酚组比较, MPEP预处理+丙泊酚组的EP2(0.036±0.001)和EP4(0.391±0.001)受体含量以及表达均明显下降(P<0.05),EP2和EP4受体mRNA的表达均明显减弱,两组比较有显著性差异(P<0.05)。  结论:丙泊酚所致的注射痛与EP2、EP4受体在脊髓表达水平上升密切相关。mGluR5受体拮抗剂能明显降低丙泊酚所致的注射痛,其作用机制可能是通过抑制EP2、EP4受体在脊髓的表达、降低脊髓内EP2、EP4受体含量来实现的。
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