无忧汤对抑郁模型大鼠海马BDNF和TrkB表达的实验研究

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目的:通过建立孤养和慢性温和不可预见性应激刺激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,观察无忧汤对慢性应激抑郁模型大鼠行为学和海马CA1区脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其受体酪氨酸激酶B (Tyrosine related receptor kinase B,TrkB)蛋白表达的影响,探讨无忧汤的抗抑郁机理是否与海马神经营养因子BDNF和TrKB的表达有关,为进一步开发该方的抗抑郁机理提供实验基础。方法:1.模型制备:采用以下8种应激刺激方法:禁水、禁食、夹尾、昼夜颠倒、电击足底、水平震荡、冰水游泳、热刺激,进行抑郁大鼠模型的制备。每天随机安排一种刺激,持续应激刺激21天。2.分组给药:将60只大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、氟西汀组、无忧汤高、中、低剂量组,每组10只。正常对照组自由饮食饮水,模型组每天2mL生理盐水灌胃,无忧汤高、中、低剂量组按每天9.84g/kg、4.9g/kg、2.46g/kg灌胃给药,氟西汀组每日按16.3mg/kg灌胃给药。每天给药一次,连续21天。3.指标检测:在造模前(0天)、造模后(21天)、给药后(42天)进行大鼠行为学检测;并在实验结束后利用免疫组化方法,观察无忧汤对抑郁模型大鼠海马CA1区BDNF和TrkB表达的影响;利用HE染色观察大鼠海马CA1区阳性细胞细胞数量及形态结构的变化。结果:1.适应性饲养一周期间观察各组大鼠一般情况正常,行为学检测无统计学意义(P>0.05)。2.经过21天造模后,模型组大鼠一般情况变化较大,毛色干枯、活动减少、反应迟钝,敞箱实验水平得分、垂直得分较正常对照组明显下降(P<0.05),提示造模成功。3.成功大鼠模型经过21天药物干预后,氟西汀组、无忧汤高、中、低剂量组大鼠的敞箱实验水平得分、垂直得分均较模型组有所提高(P<0.05)。4.与正常对照组比较,模型组大鼠海马BDNF和TrkB阳性表达率降低(P<0.05);与模型组相比较,无忧汤高、中剂量组和氟西汀组大鼠海马BDNF和TrkB阳性表达提高(P<0.05)。5. HE染色可见模型组大鼠海马CA1区神经元细胞与正常对照组比,数量减少、排列稀疏、少量细胞核变形。结论:1.孤养加慢性温和不可预见性应激刺激制备抑郁大鼠模型,能为无忧汤的进一步研究奠定实验基础。2.无忧汤能改善抑郁模型大鼠的抑郁状态。3.无忧汤对抑郁大鼠有抗抑郁作用,其作用机制与提高慢性应激模型大鼠海马CA1区脑源性神经营养因子BDNF和TrkB的表达有关。
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