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本试验以湖北百合(Lilium henryi Baker)的鳞叶、叶片、花器官、无菌苗叶片和再生小鳞茎的鳞叶为外植体,接种在附加不同浓度及组合的6-BA、NAA、KT、IAA的培养基中进行离体培养,通过愈伤组织和不定芽诱导途径,研究了影响湖北百合组培快繁的主要因子,着重探索了湖北百合组织培养的最佳外植体材料、培养基种类和培养方法,以期获得湖北百合组织培养的一套完整再生体系。结果表明:1.湖北百合的鳞叶、叶片的污染率较高,出愈率很低;花器官中的子房、花托诱导分化率高,不定芽数量多,从诱导时间和芽的生长状况花托好于子房,其它花器官部位死亡率较高;无菌苗叶片、再生小鳞茎的鳞叶无污染,数量多,基数大,增值快,且一次成苗。因此花托、无菌苗叶片和再生小鳞茎的鳞叶为湖北百合的最佳组织培养外植体。2.花托的最佳诱导分化培养基为MS+6-BA2.0(单位mg/L,下同)+NAA0.2,此时分化率为96.67%,分化系数为3.1。无菌苗的最佳诱导分化培养基为MS+6-BA0.5+NAA0.5,分化率为66.67%,芽分化系数为2.0,此时产生的愈伤组织较多,芽也健壮,根较少。以再生小鳞茎的鳞叶为外植体,最佳诱导培养基为6-BA0.5+NAA1.0+KT0.2,分化率为100.00%,芽分化系数3.8,小芽成苗快,生长健壮。3.增殖培养阶段,以MS+6-BA1.0+NAA0.05作为增殖培养基最好,增殖系数为3.2,愈伤组织较多,继续分化不定芽的潜力大,苗高均匀,球茎膨大也显著。4.降低大量元素的浓度有利于湖北百合的生根,其中较适浓度为1/2MS;NAA对生根促进作用较IAA好,最佳浓度为0.3mg/L:最佳的生根糖浓度为60mg/L;活性炭对湖北百合根的伸长起促进作用;0.5mg/L的多效唑起到矮化植株的作用,生根率为100%,平均根数6.6,此时叶片肥厚,深绿色,多2片,为后期的无菌苗移栽成活率提供了保障。综合各项因素,最佳的生根培养基为1/2MS+NA.A0.3+0.5mg/LPP333+60g/L糖。5.糖和矮壮素对湖北百合球茎的膨大有影响。MS+6-BA1.0+NAA0.05的培养基中附加3.0mg/L的矮壮素,对湖北百合小鳞茎的膨大具有显著效果,平均鳞茎增重182mg。30~80g/L的糖浓度,对小鳞茎增重有较好的作用,此范围内小鳞茎直径、增重量会随糖浓度的增大而增大。糖浓度较高,湖北百合试管苗生长不良,因此,80g/L糖浓度更有利于湖北百合鳞茎的膨大。