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目的急性肝损伤是以爆发性肝功能异常以及炎症反应为特征的疾病,目前其发病机制并不清楚。Tim-3（T cell Ig and mucin domain protein 3）属于T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域分子（TIM）家族中的成员,是免疫系统中的一种抑制性分子,研究表明Tim-3与肝脏疾病的进展密切相关。本研究旨通过免疫调控Tim-3分子在急性肝损伤小鼠模型基础上探究其TLR4炎症信号通路的作用机制,为临床肝损伤疾病的研究奠定基础。方法动物实验:1、构建急性肝损伤动物模型。将20只小鼠随机分为对照组（10只）,实验组（10只）。对照组小鼠腹腔内注射橄榄油（0.1mL/10g）,实验组注射0.5%CCl4橄榄油溶液（0.1mL/10g,CCl4与橄榄油的比例是1:200）,检测Tim-3在急性肝损伤中的表达情况。2、免疫调控Tim-3,检测TLR4信号通路。将20只小鼠随机分两组,即对照组（10只）和实验组（10只）,分别在对照组小鼠腹腔注射IgG2a（0.1mg）,实验组小鼠腹腔注射抑制剂anti-Tim-3Ab（0.1mg）,6小时后在对照组和实验组小鼠腹腔内注射0.5%CCl4橄榄油溶液。肝损伤24小时后利用RT-qPCR方法检测对照组和抑制剂组中炎症因子IL-1β、IL-6、IFN-?和TNF-α的mRNA水平;Western-blot检测TLR4相关蛋白的表达;TUNEL和HE的方法分别检测肝细胞凋亡和小鼠肝损伤情况。3、在TLR4-/-小鼠中免疫调控Tim-3分子后检测肝损伤情况。将野生型小鼠和TLR4-/-小鼠随机分为WT组,WT+anti-Tim-3Ab（0.1mg）组,TLR4-/-组,TLR4-/-+anti-Tim-3Ab（0.1mg）组,6小时后在各组小鼠腹腔内注射0.5%CCl4橄榄油溶液。利用RT-qPCR的方法检测炎症因子IL-6、IL-10和IL-1β水平的变化,HE染色检测肝损伤程度。细胞实验:无菌条件下分离脾细胞,在刀豆蛋白（ConA,5μg/mL）刺激下给予抑制剂anti-Tim-3Ab（10μg/mL）干预24h。无菌分离出来的脾细胞与RAW264.7细胞共培养,分别给与抑制剂anti-Tim-3Ab（10μg/mL）和Gal-9（0.2μM）干预24h在ConA作用下（5μg/mL）,利用ELISA的方法检测炎症因子IFN-γ和IL-6的变化。结果（1）动物实验结果:成功构建了急性肝损伤模型。免疫组化的结果显示在0.5%CCl4诱导的急性肝损伤中Tim-3的蛋白表达水平是增高的与对照组比较（P<0.001）;利用Western-blot的方法同样得出在急性肝损伤小鼠体内Tim-3的表达水平是增高的相比于对照组（P<0.05）;RT-qPCR的结果显示在急性肝损伤中Tim-3的mRNA水平是增高的（P<0.01）。在anti-Tim-3Ab组中,IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α的mRNA水平增高,且TLR4及NF-κB的蛋白水平表达增高相比于对照组（P<0.05）。HE染和TUNEL检测结果提示与对照组比较,anti-Tim-3Ab组中肝损伤的炎症程度加重且肝细胞凋亡增多。在TLR4-/-小鼠体内免疫调控Tim-3诱导急性肝损伤,HE染色的结果提示TLR4-/-小鼠中注射抑制剂anti-Tim-3Ab后的肝损伤程度降低较对照组;RT-qPCR结果提示IL-6的mRNA水平降低（P<0.05）,抑炎因子IL-10的mRNA水平明显升高与对照组比较（P<0.01）。（2）细胞实验结果:ELISA检测结果显示在anti-Tim-3Ab组中IFN-γ和IL-6的活化水平是升高的（P<0.05）,Gal-9组中IL-6的活化水平是降低的（P<0.05）。结论成功构建了CCl4诱导的小鼠肝损伤模型,在小鼠肝损伤中Tim-3分子高表达,为进一步研究肝损伤提供了理论依据。免疫调控Tim-3能加重炎症反应,Tim-3分子在一定程度上能负向调控TLR4信号通路,为探究炎症与肝损伤修复提供了实验依据。