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Ri质粒上含有诱根基因即rol基因，将Ri质粒或单个或几个rol基因组合导入植物体内均能提高植物的生根能力，但是某些植物在转入rol基因后往往会使植株表现出一些不良的变异，如出现了植株矮化、叶面皱缩、节间缩短、分支能力增强等性状，对植物的生长发育产生很大的影响。为减少rol基因对植物造成的不良变异，本文以刘兴菊研究的转Ri质粒30148菌株的三倍体毛白杨3个无性系为研究对象，通过对叶片再生体系和遗传转化条件的优化，建立了高效离体再生系统和遗传转化体系，并将rolB、rolC诱根基因导入转Ri质粒的三倍体毛白杨，对部分转化再生植株进行了形态鉴定、PCR检测和GUS组织化学染色检测，并对转化植株形态及生长变异和叶片解剖结构进行了初步研究，主要研究内容及结果如下：1．进行了叶片外殖体高效再生系统的研究，筛选出转Ri质粒的三倍体毛白杨叶片诱导不定芽的适宜培养基为：MS+6-BA1.0mg．L-1+NAA0.05mg．L-1，诱导不定根的适宜培养基为：MS+NAA0.1mg．L-1。并以此种诱导不定芽的适宜培养基，研究了暗培养对诱导叶片不定芽的影响，结果表明，暗培养5d对不定芽诱导是有利的。2．通过卡那霉素（Km）敏感性试验，确定了诱导叶片外殖体不定芽的Km临界耐受浓度为30mg．L-1。同时研究了头孢噻肟钠（CTX）对诱导转Ri质粒的三倍体毛白杨叶片不定芽的影响和对农杆菌的抑菌效果，结果表明，CTX适宜的抑菌浓度为400mg．L-1。3．对影响农杆菌转化效率的几个主要因素进行研究发现，转Ri质粒的三倍体毛白杨叶片外殖体适宜的侵菌时间是8min，侵染后共培养2d可获得较好的转化效果。4．分别将含质粒pCMB-B∶GUS和pPCV002-CaMVC的农杆菌与转Ri质粒的三倍体毛白杨叶片共培养，通过在50mg．L-1Km的培养基上筛选后，获得了Km抗性植株，对部分抗性植株进行了PCR检测，证明rolB、rolC基因已整合到转Ri质粒三倍体毛白杨的基因组中，对部分PCR检测呈阳性的pCMB-B∶GUS转基因无性系进行组织化学染色分析表明，GUS基因主要在根尖、茎及叶脉维管束组织中特异表达。5．进行了转基因植株形态及生长变异的研究，发现与转Ri质粒三倍体毛白杨相比，大部分转rolB基因无性系植株矮化，叶面积增加，茎分支能力增强，节间距缩短，生根率及根数量降低，高生长量减少；大部分转rolC基因无性系叶面由原来的皱缩变为平展，茎分支能力增强，节间距缩短明显，生根率、根数量及高生长量增加。6．对转基因植株叶片解剖结构及组织厚度进行了观察，结果表明，转基因无性系叶片解剖结构变化不明显。大部分转rolB基因无性系叶片厚度、叶肉厚度与其转Ri质粒无性系对照相比差异显著，栅栏组织和海绵组织厚度差异不显著，50％的转rolB基因无性系的表皮厚度与其转Ri质粒无性系对照相比差异显著。大部份转rolC基因无性系叶片厚度、叶肉厚度与其转Ri质粒无性系对照相比差异不显著。转Ri质粒不同无性系在转rolC基因后，栅栏组织厚度变异程度不同，75％的转rolC基因无性系海绵组织厚度与其转Ri质粒无性系对照有显著差异。转rolC基因无性系的表皮厚度与其转Ri质粒无性系对照无显著差异。