烟草黑胫病高效生防木霉菌的筛选及其拮抗机制的研究

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从湖南宁乡、永州、郴州、湘西等感染烟草黑胫病的大田收集并分离纯化20株来自不同地方的烟草黑胫病病原菌,且对其进行致病力的测定,筛选出12种致病力较强的菌种,并对其进行DNA的提取,以及克隆测序,最后构建进化树,结果表明这12个菌种之间差异度极低,遗传距离近(远远低于0.05)个体之间基本没有发生变异。从湖南省内不同地方采集不同土壤类型,分离出16种木霉,并对其作出初步鉴定。通过与供试病原菌对峙培养,生长速度测定复筛出T1-16具有较强的竞争和寄生能力,且生长速度快,产孢多,具有抑菌谱广的特点。通过对T1-16木霉菌株的拮抗机制研究,结果表明T1-16具有较强的营养竞争和空间竞争能力,通过对T1-16平板培养测定出其产生了抗生素以及β-1,3葡聚糖酶和纤维素酶,抑制烟草黑胫病菌的生长。对所筛选木霉菌株进行了优良发酵条件的筛选,结果表明木霉菌株培养的最适温度为25-28℃,光照对木霉菌丝生长无影响,但对孢子萌发影响显著,pH值5-6时菌丝生长最快,孢子萌发率也最高。同时确定了乳糖为最佳碳源,天门冬素为最佳氮源。烟草黑胫病拮抗木霉在土壤,叶面,根部生长动态研究结果表明木霉在未灭菌土壤上受到土壤强烈抑制,在未灭菌的土壤中这种抑制效果很低。T1-16在烟草叶面主要定殖在气孔部位,叶面凹陷部位。含水量在3%的时候,T1-16的定殖数量最高,偏酸性的环境有利于T1-16的生长与定殖。
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