抗病毒RNAi是一类广泛而且保守的表观遗传学调控过程,近似于RNAi介导的基因沉默。病毒侵染后,复制中产生的双链RNA(ds RNAs)被Dicer蛋白识别并切割成长度为21-30 nt的si RNA,si RNA与AGO形成RISC复合体诱导病毒RNA的降解或翻译。拟南芥共编码4种DCL蛋白和5种DRB蛋白。其中,DCL4切割产生的21 nt的si RNA在抗病毒免疫中起主要作用。DCL4与双链RNA(ds RNA)结合蛋白(ds RBP)DRB4的特异性相互作用在植物内源si RNA的产生中起关键作用,然而,DRB4在抗病毒过程中的具体功能还未知。本研究通过CRISPR/CAS9基因编辑技术获得drb4突变体,接种病毒后发现,病毒含量在drb4突变体中并未明显增加,可能其它DRB存在重复功能。然而,我们研究发现DRB4与实验室新发现的抗病毒调控因子GLTP1和LPEAT1相互作用。此外,我们发现,在抗病毒RNAi缺陷的ala1/ala2突变体,DRB4-YFP融合蛋白的定位发生明显变化。本研究结果为揭示DRB4在抗病毒RNAi中的具体功能奠定了一定基础。番茄是一种重要的经济蔬菜作物,病毒严重危害番茄生产。研究番茄中抗病毒RNAi具有重要理论和实践意义。实验室利用VSR缺失的黄瓜花叶病毒建立了遗传筛选体系研究植物抗病毒RNAi。番茄是CMV的天然寄主之一。该系统可能同样为研究番茄中的抗病毒RNAi提供良好平台。初步的研究发现野生型CMV能在番茄Microtom中大量复制繁殖,导致植物出现严重病症,而VSR缺失的CMV在Microtom中不能有效复制繁殖,植物生长发育正常。研究表明不仅抗病毒RNAi在番茄的抗病毒免疫中同样起重要作用,也提示CMV-Δ2b为研究番茄抗病毒免疫提供有力武器。我们利用CRISPR敲除番茄AC中RDR1,AGO1和番茄Microtom中DCL2,DCL4,将进一步探索它们在番茄抗病毒RNAi中的功能。这将为研究番茄的抗病毒RNAi机制打下基础,为农业生产实践提供新的策略。