人白细胞介素1,6的表达与椎间盘源性腰腿痛程度相关性的实验研究

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目的:检测人白细胞介素1,6(Interleukin1,6IL-1,6)在椎间盘源性腰腿痛患者椎间盘中的表达,评估、记录其腰痛JOA评分,分析其相关性。方法:(1)选取同种族同地区45-65岁之间共30人纳入本项目研究,所有患者经三名脊柱外科医生独立诊断,医院伦理委员会同意方纳入研究。纳入标准为:反复腰腿痛3月以上,口服非甾体抗炎药2月后疼痛无缓解,影像学资料提示腰椎间盘退变而无椎间盘突出,退变节段存在明显的腰椎不稳。以一年内无腰腿痛病史,因外伤导致腰椎骨折需行手术治疗,影像学资料未提示腰椎间盘退变作为对照。以改良腰痛JOA(Japanese Orthopedic Association Scores,JOA)评分评估椎间盘源性下腰痛的程度,最高为29分,最低为0分,评分越低表明功能障碍越严重。(2)实验组用自制椎间盘标本取材器取离椎体后缘3cm椎间盘作为实验标本,分别固定及低温保存备用。对照组在行前路椎间盘髓核摘除术时,切取同深度的椎间盘标本并固定及低温保存。(3)免疫组化法检测实验组与对照组椎间盘组织中IL-1和IL-6的表达。(4)Western-blot实验半定量检测实验组与对照组椎间盘中IL-1和IL-6的含量。(5)用Quantity One4.62图谱分析软件及SPSS19.0统计学分析软件对所得实验数据进行分析,探讨IL-1,IL-6与JOA评分之间的相关性。结果:实验组椎间盘组织免疫组化染色阳性的细胞,主要为成纤维细胞和软骨细胞等,呈散在地分布,镜下背景为浅黄色,胞浆呈棕黄色着色,细胞核呈淡蓝色,对照组椎间盘组织免疫组化染色未见阳性反应细胞。实验组与对照组IL-1与IL-6的表达值分别为12.509±0.845,32.965±0.224,2.564±0.172,6.402±0.195,差异有统计学意义(P<0.05)。Western-Blot半定量检测IL-1与IL-6在实验组与对照组中表达的灰度值与β-actin参照值比值分别为1.509±0.829、0.965±0.237和0.464±0.132、0.502±0.135,均有统计学意义(P<0.05)。实验组术前JOA评分最低分7分,最高分16分。实验组IL-1含量与下腰痛JOA评分直线相关分析结果:r=-0.880,P=0.0005,P<0.05,差异有统计学意义, IL-1含量与下腰痛JOA评分呈负相关。实验组IL-6含量与患者下腰痛JOA评分直线相关分析结果:r=-0.890,P=0.0042,P<0.05,差异有统计学意义,IL-6含量与下腰痛JOA评分呈负相关。结论: IL-1和IL-6在正常和退变椎间盘中均有表达,其表达强度在退变组明显高于正常组。IL-1和IL-6表达强度与椎间盘源性腰腿痛程度呈负相关,表明IL-1和IL-6在退变椎间盘中的升高,在椎间盘源性下腰痛中起着重要作用。
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