蛋白质间相互作用的研究作为了解蛋白质生物功能的重要手段之一,在功能基因组学研究中极为重要。蛋白质间相互作用存在于机体每个细胞的生命活动过程中。生物学中的许多现象如细胞凋亡、细胞周期调控、信号转导和癌变等均受蛋白质间相互作用的调控。研究蛋白质间的相互作用有多种方法,常用的如酵母双杂交系统、亲和层析、免疫沉淀、蛋白质交联及GST沉淀（GST pull-down）技术等。其中,酵母双杂交系统是当前发展迅速、应用广泛的主要方法。Tec（tyrosine kinase expressed in hepatocellular carcinoma）是一种存在于胞质内的非受体型蛋白酪氨酸激酶,最初于肝癌组织中筛选得到,它参与多种细胞因子的信号传递过程,是多种细胞因子、辅助分子及受体型PTK信号转导过程中一个重要的靶分子。一方面,Tec能够对受体型蛋白酪氨酸激酶（包括生长因子受体、细胞因子受体、G蛋白耦联受体、抗原受体）及整合素等传导的各种胞外刺激做出反应[1,2]。同时,Tec可以被许多非受体型蛋白酪氨酸激酶调节,如:Src、JAK、Syk和FAK家族激酶等。Tec还可以调节多种主要信号传导路径,包括磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-K）通路、磷脂酶C（PLC ）[3-5]通路以及蛋白激酶C（PKC）通路[6]。研究表明,Tec是造血细胞和免疫细胞活化、发育、增值和成熟信号转导途径中关键的蛋白激酶连接分子,而Tec的激酶结构域是其特征性结构之一,通过对这一结构域及其相互作用蛋白分子的研究,将为我们深入地了解Tec的功能,阐明其在细胞扩增及诱导分化信号转导途径中的位置和作用提供重要的线索。我们前期工作以Tec激酶结构域作为“钓饵”蛋白,利用酵母双杂交技术筛选构建于转录激活结构域（AD）载体的cDNA文库,经营养缺陷选择及诱导筛选,发现并确证了一个新的阳性克隆。本研究对筛库所得基因片段测序并经BLAST比对分析后,确定为RAI16（Homo sapiens retinoic acid induced 16）基因,已被GeneBank收录（编号为BC052237）,组织来源为脑Ⅳ型星状细胞瘤,其编码蛋白为人视黄酸诱导蛋白16。随后以RAI16蛋白为切入点,一方面利用相关的生物信息学站点及计算机软件,对RAI16进行生物信息学分析,从中获得其编码蛋白质结构方面的重要信息,从而根据结构预测其功能;另一方面将RAI16基因构建于原核表达载体中,进行融合表达,并进一步纯化融合蛋白,为下一步RAI16功能研究奠定重要基础。