六溴环十二烷对玉米幼苗基因毒性的研究

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六溴环十二烷(HBCD)是当前生产量最大的溴代阻燃剂之一,由于其具备普遍的持久性有机污染的特征,现已被很多国家禁用,但是其在环境中的存在及对生物体的伤害仍不容忽视。本研究采用高效液相色谱(HPLC)法对HBCD的三个对映体进行分离制备,以玉米为受试作物,采用去离子水培养的方法,分别在0.5、1.0、2.0、3.0和5.0μg·L-1浓度梯度的暴露液下对玉米幼苗进行培养。采用随机引物扩增多态性法(RAPD)对玉米体内基因稳定性进行检测,增色效应确定玉米体内基因损伤类型以及通过荧光定量PCR的方法,检测不同超氧化物歧化酶基因表达的差异性。开展HBCD对玉米幼苗基因损伤方面的研究,主要结果如下:1)经过72 h的HBCD暴露培养后,玉米体内的DNA稳定性明显受到影响,(rac)α-HBCD的毒性要高于(rac)β-HBCD,(rac)γ-HBCD的毒性最弱,(+)构型的毒性要明显高于(-)构型的,根部基因损伤的程度要高于地上部的损伤。2)经过72 h的HBCD不同异构体和对映体暴露培养后,DNA呈现不同程度的交联损伤和断裂损伤,根部受到的损伤要高于地上部的。α-HBCD和γ-HBCD对于地上和根部的DNA损伤均是(+)构型毒性大,(-)构型毒性小,(-)β-HBCD对于地上部毒性比(+)β-HBCD大,但是对于根部DNA的损伤要小于(+)β-HBCD。3)72 h HBCD的暴露培养会影响玉米体内超氧化物歧化酶的表达,其中α-HBCD和β-HBCD主要影响位于细胞质中的Cu/Zn-SOD基因和在叶绿体为主的Fe-SOD基因的表达;相对另外两者,γ-HBCD对位于线粒体中的Mn-SOD基因的表达的影响更为明显。总体的毒性大小顺序为α-HBCD>β-HBCD>γ-HBCD。不同对映体之间:(+)α-HBCD对于玉米体内基因表达的影响高于(-)α-HBCD,(+)β-HBCD对根部Cu/Zn-SOD、Fe-SOD、Mn-SOD和地上部Cu/Zn-SOD基因的表达更显著,而(-)β-HBCD对叶部Fe-SOD、Mn-SOD基因的表达影响更大。(+)γ-HBCD对映体影响玉米体内Cu/Zn-SOD、Mn-SOD基因的表达更明显,而(-)γ-HBCD对玉米体内Fe-SOD的影响更大。
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