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研究背景:子宫腺肌病诊断和分类需综合考察影像和子宫腺肌组织的组织病理学检查的结果。尽管是病理诊断目前的金标准,但是具有侵入性的,使盆腔器官的病变风险增加,子宫腺肌病常常难以明确诊断,一般会延缓7-10年的诊断时间。相比之下,基于血液的液体活组织检查可以提供非侵入性和灵敏性的方法,血清miRNA近年来已经成为分子诊断的热点并可以有效应用于临床,它具有结构稳定,检测方便、成本低廉、具有良好的重复性等优点。本课题的目的就是在于筛选并获得子宫腺肌病特异性的血清miRNAs生物标志物组合,探讨其应用至临床诊断中的可行性,基于血清miRNAs探讨作为分子标志物用于鉴别子宫腺肌病与妇科良性肿瘤诊断的可行性,探讨中药汤剂玄丹散结汤与促性腺释放激素激动剂(GnRH-a)治疗对子宫腺肌病候选miRNAs的影响,探究其作为子宫腺肌病中西医治疗的疗效观察指标的可能性。研究方法:(1)利用高通量测序技术对子宫腺肌病增殖期和正常女性对照组各30、例血清中的所有miRNAs进行初步筛选,随后运用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)在增殖期血清在子宫和正常女性对照组各108例对初筛得出的差异表达的候选miRNAs进行复筛和验证。(2)运用qRT-PCR技术在96例女性患者(其中子宫腺肌病、子宫肌瘤、子宫内膜息肉、子宫内膜异位症各24例)对具有高度特异性、差异表达的候选miRNAs进行验证。(3)运用qRT-PCR技术在12例未经任何治疗的初诊子宫腺肌病患者的血清、12例为中医证候类型判定为气滞血瘀型且接受玄丹散结汤口服治疗3个月的子宫腺肌病患者的血清、12例为西医诊断为子宫腺肌病且经GnRH-a 3个周期治疗的患者的血清对差异表达的候选miRNAs进行验证。研究结果:(1)研究组子宫腺肌病患者增殖期血清中miRNAs的表达水平与对照组存在显著差异,P<0.05。上调的miRNAs有249个,下调的miRNAs有64个,进一步筛选验证后发血清中hsa-miR-101-3p,hsa-miR-143-3p这两个miRNA在子宫腺肌病增殖期患者中表达量明显升高。随着月经量增多、痛经加重,子宫腺肌病患者血清中hsa-miR-101-3p表达量呈上升趋势,hsa-miR-143-3p与月经量评分无明显相关性,但随着痛经加重,子宫腺肌病患者血清中hsa-miR-143-3p表达量呈上升趋势,hsa-miR-101-3p、hsa-miR-143-3p表达量均与血清CA125水平呈正相关。(2)hsa-miR-101-3p,hsa-miR-143-3p这两个miRNA在子宫腺肌病患者血清中表达量较子宫肌瘤、子宫内膜息肉、子宫内膜异位症均异常表达明显(3)hsa-miR-101-3p,hsa-miR-143-3p在子宫腺肌病玄丹散结汤、GnRH-a治疗前后的患者血清中表达量均下降明显,P<0.05,具有统计学意义。研究结论:(1)hsa-miR-101-3p,hsa-miR-143-3p有望成为子宫腺肌病的分子生物学筛查指标,可联合月经量、痛经程度、CA125等结果,对子宫腺肌病的进行初步的分期分层筛选,为实现早期诊断的目标奠定无创诊断的基础。(2)hsa-miR-101-3p,hsa-miR-143-3p可作为子宫腺肌病与子宫肌瘤、子宫内膜息肉、子宫内膜异位症的鉴别诊断生物标志物。(3)玄丹散结汤、GnRH-a治疗均可以影响子宫腺肌病患者血清中hsa-miR-101-3p,hsa-miR-143-3p的表达量,差异的miRNAs组合有望成为中西医结合治疗气滞血瘀型子宫腺肌病的血清学疗效观察指标。