中药复方抗SIV和PRRSV的作用效果及机制研究

来源 :佛山科学技术学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yediwuqiang
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本研究在前期抗猪流感和猪繁殖与呼吸综合征中药单方筛选的基础上,首先利用BALB/C小鼠感染猪流感病毒模型对中药复方进行初步筛选,然后研究有效中药复方对感染SIV小鼠的保护作用及其机制;再用SPF鸡胚和Marc-145细胞对中药复方体外抗SIV和PRRSV的效果进行验证。综合体内和体外试验结果,筛选一个可同时抗SIV和PRRSV两种病毒的效果最好的中药复方;最后通过研究不同浓度的中药复方对感染SIV的小鼠的保护作用以及免疫调节作用,确定其最佳浓度,阐明其作用机制。结果显示,对于感染SIV的小鼠,复方一、四和七复方组的小鼠体重下降幅度小、恢复速度快;三个复方能显著降低感染H1N1亚型流感病毒小鼠的肺指数(P﹤0.01);对于感染H3N2亚型流感病毒的小鼠,三个复方均能降低肺指数,但只有复方七与模型对照组差异显著(P﹤0.05)。肺病理组织学观察发现,模型对照组的肺组织肺泡隔断裂,肺泡腔增大;麻杏石甘散组小鼠的肺组织出现大范围的出血症状;利巴韦林组小鼠肺组织有实质性病变;而三个复方组的肺组织无明显病变,肺泡间隔和肺泡壁厚度正常。结果提示,复方一、复方四和复方七具有较好的抗H1N1和H3N2亚型猪流感效果。复方一、复方四和复方七均能增加血浆中IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α浓度,且能提高SOD和GSH浓度,降低MDA的浓度,与模型对照组差异极显著(P﹤0.01)。提示三个复方能通过减轻机体的炎症反应、提高抗氧化能力的机制,来增强机体的抗病毒能力,抵抗病毒损伤。对于感染H1N1亚型流感病毒的小鼠,三种复方能增加血液中CD3~+、CD4~+/CD3~+和CD8~+/CD3~+的比值,但对CD49b~+/CD3~-的比值无影响;对于感染H3N2亚型流感病毒的小鼠,三种复方对CD3~+、CD4~+/CD3~+、CD8~+/CD3~+和CD49b~+/CD3~-的比值均有调节作用,其中复方一组小鼠血液中CD3~+低于模型对照组,复方四组小鼠血液中CD49b~+/CD3~-的比值显著高于模型对照组(P﹤0.05),这些结果提示复方一和复方四可能是通过调节小鼠体内淋巴细胞亚群来发挥抗SIV的作用。在复方体外抗SIV的实验中,复方一和复方四的血凝效价显著低于模型对照组(P﹤0.05),提示复方一和复方四具有直接抗SIV的作用。在体外抗PRRSV的实验中,复方四的作用最好。其在阻断作用、抑制作用和直接杀灭作用中,复方四对细胞的保护率能分别达到70.15%、72.94%和96.13%,复方一抗PRRSV的作用最弱。综合以上体内和体外抗SIV的实验以及体外抗PRRSV的实验结果,复方四是同时抗SIV和PRRSV两种病毒的最佳复方。其抗SIV的机制是直接抗SIV作用、减轻感染SIV小鼠的炎症反应和提高小鼠的抗氧化能力;其抗PRRSV的主要机制是通过直接杀灭病毒、阻止病毒吸附以及抑制病毒增殖三种方式。本实验研究了1 g/mL、0.5 g/mL和0.25 g/mL三种浓度的复方四体内抗SIV的效果。结果显示:0.25 g/mL浓度的复方四对感染SIV小鼠的体重有较强的保护作用,能显著降低小鼠肺指数,与模型对照组差异极显著(P﹤0.01)。肺病理组织学观察发现,肺组织正常,未见出血、肺泡隔断裂等病变。这些结果提示,0.25 g/mL浓度的复方四对感染SIV小鼠的防治效果最好。0.5 g/mL组可以显著提高CD3~+、CD4~+/CD3~+和CD8~+/CD3~+的比值,但是对CD49b~+/CD3的比值~-无影响,这个结果提示,复方四对淋巴细胞亚群的调节作用可能与浓度有关。
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