油茶叶茶饼病病理学及其病原菌生物学特性的研究

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油茶是世界上四大木本油料之一,它在我国的栽种面积达到400万公顷以上。由于每年清明前后受外担子菌的侵害,油茶的生长受到严重抑制及破坏并最终导致其产量下降。但是目前对于茶饼病病理学的研究却很少。本文拟以病程不同的油茶叶作为研究材料,通过外担子菌生物学特性和受其侵染后的油茶叶生理生化指标、内源激素及可溶性蛋白组分的研究,探讨了油茶叶片受外担子菌侵染后的生理生化响应规律,从而为深入研究油茶与外担子菌的互作机理打下基础。结果如下:经对茶饼病病原菌生物学特性的研究,发现菌落生长和孢子萌发的适合培养基为PDA培养基;油茶外担子菌在15~31℃的范围内均能生长,23~28℃为其适宜的生长温度,最适温度是25℃,低于10℃或高于35℃停止生长;在pH3~7的范围内外担子菌均能生长,适宜生长的范围为pH5~6,最适的pH为5.5,pH低于2或高于8,外担子菌停止生长。油茶叶受侵染后,其生理生化指标均发生显著变化:叶绿素和类胡萝卜素含量呈下降趋势,且明显低于对照。在病害最严重期,前者和后者的含量分别约为对照的7.36%和2.38%。超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性呈下降趋势,且始终低于对照。SOD和POD活性分别下降了87.6%和67.4%。可溶性糖含量、脯氨酸含量、丙二醛(MDA)含量和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性都先呈上升趋势,达到峰值,而后随病害加重呈下降趋势。当油茶叶呈粉红色时,可溶性糖含量、脯氨酸含量、丙二醛(MDA)含量达到最高且PAL活性最强,分别为50.23 mg·g-1FW、75.54 ug·g-1FW、63.28 umol·g-1FW和20.8U·min-1·g-1FW。植物内源激素含量变化极显著:生长素(IAA)含量先逐步上升,在粉红色叶时出现第一个峰值(19.98 ug·g-1FW,约为对照的11.68倍),然后逐渐下降,之后又开始急剧上升至对照的22.2倍。深红色油茶叶的脱落酸(ABA)含量仅约为对照的19.76%。随着病害的加重,ABA含量逐渐上升。当油茶叶呈暗金黄色时,ABA含量达到2.78 ug·g-1FW,比对照高出12.09%;而在浅白色的油茶叶中无ABA。赤霉素(GA3)含量先升高后下降。油茶叶由深红色转变成粉红色时,GA3含量增加了61.47%。随着病害的加重,GA3含量逐渐下降。另外,我们进行外担子菌发酵实验时,发现发酵液中有IAA和ABA,但含量不是很高,而GA3缺失。在SDS-PAGE电泳谱图中,病害叶蛋白的分子范围是14.4 KD~66.2KD,绝大部分集中于14.4KD~43.0KD分子量范围。比较对照的电泳谱图,病害叶中出现了约15KD的蛋白,但同时也分别缺失了约20.8KD、40.1KD和67.2KD的蛋白;并且还有约24.1KD蛋白的丰度始终高于对照;另外还有约29.4 KD蛋白只在粉红色病害叶中的丰度高于对照。
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