【摘 要】
:
该论文尝试通过非培养和培养的方法从盐碱湖土壤样品中获得极端酶资源.一方面我们通过获取环境样品中的总DNA建立了环境DNA文库,从文库中筛选酶基因或者基因片段;另一方面分
论文部分内容阅读
该论文尝试通过非培养和培养的方法从盐碱湖土壤样品中获得极端酶资源.一方面我们通过获取环境样品中的总DNA建立了环境DNA文库,从文库中筛选酶基因或者基因片段;另一方面分离培养环境样品中的微生物,从分离纯化的菌株中筛选产酶菌株进而纯化酶.在建立土壤样品的DNA文库时,我们首先对盐碱湖土壤进行透析,除去土壤中盐分,用液氮冻融方法使细胞裂解,利用CTAB和PVPP结合的方法除去土壤中的腐殖质成分,最后得到了高纯度的DNA样品,经16SrRNA PCR检测样品中含有古菌及细菌.将所获得的DNA样品经超声波打断后连接到pUC18质粒,转化E.coli DH 10B,建立插入片段为3-6kb的环境基因文库.对文库的部分克隆进行了测序,通过数据库的相关数据比对,对序列功能进行分析,发现部分克隆为酶基因片段,包括一个碱性木聚糖酶部分序列.对同一环境样品纯化得到的菌株进行了淀粉酶、纤维素酶、琼脂糖酶、木聚糖酶、海藻酸盐裂解酶、透明质酸裂解酶、黄原胶裂解酶、香豆胶裂解酶、瓜儿胶裂解酶菌株的筛选,得到部分产酶菌株.对其中一株Bacillus sp.ZBAW6的木聚糖酶进行了分离纯化和性质测定.该酶分子量约为45kDa左右;在pH5.5~10.5范围内均具有较高酶活性和稳定性;最适反应温度为70℃,65℃保温120分钟,酶活力基本不变.该酶作用于Beech-xylan的K<,m>为0.11mg/ml,V<,max>为23.89umol/min·mg.金属离子中Hg<2+>对该酶有强抑制作用.通过PCR的方法得到部分酶基因,经测序N末端序列为DPFAAAVAPL.
其他文献
革兰氏阳性菌Leifsonia xyli subsp.Cynodotis(Lxc)的天然质粒pCXC100中的一个800bp片段对质粒的稳定性起着关键性作用.研究表明该DNA片段也能提高不同质粒在E.coli中的稳定
高效液相色谱法是分析萘乙酸的有效手段.但是在分析测定提取液时,仍会遇到谱峰重叠、拖尾等现象.因此,对样品预处理方法和色谱检测条件的选择显得尤为重要.试验结果证明,采用
随着当今城市化和工业化的快速演进伴随着越来越多的环境问题.因此,在当代城市规划建设中,通过重视对园林建设的工作来改善城市中的环境,使城市在建设中逐步进步也提高人们的
文章阐述了社区居家养老的内涵,分析了社区居家养老模式下的建筑设计原则,针对社区居家养老模式的建筑设计进行探究,为各区域社区居家养老提供一定的理论参考.
该项目通过对黄松的组织培养和微体快繁技术的研究,在离体培养条件下,以美国黄松成熟胚为外植体获得了再生小植株,初步探索了美国黄松微体快繁的有效途径,为其工厂化育苗提供
变电站是电力系统的重要组成部分,目前对站内设备的检测还主要依靠人工巡检的方式,很多因素造成人工巡检效率低、工作不到位、不能及时发现设备故障隐患等问题。尤其是近几年
随着科学技术与电子技术的不断发展,电梯已经悄然融入到人们的生活与工作之中,其应用越来越频繁,进而可能衍生的安全事故就会越多.强化对电梯机械故障的合理化诊断,降低电梯
该论文利用全细胞膜片钳技术对Novikoff细胞上的间隙连接半通道进行了研究.为了排除其它离子流对半通道电流的干扰,我们首先对Novikoff细胞上可能存在的离子流进行了研究.我
随着科技水平的发展,太赫兹光谱技术逐渐成熟。它因其在无损检测方面的优越性,越来越受到人们的关注。通过太赫兹时域谱测量可以直接获得样品的吸收系数、折射率等参数,还可以通过对特征吸收的分析来研究物质的组成成分及结构信息。聚合物电介质由于其出色的电学性能被广泛的应用于电气工程领域,光谱检测法在研究电介质分子内部运动及微观作用力方面起着重要的作用。太赫兹时域光谱技术由于其特殊的频段位置,能够很好的表征大分
水利工程建筑过程中最重要的一个环节就是设计,整个工程的质量在很大程度上都受设计质量的直接影响.在进行设计的过程中,设计人员应当对水利工程所使用到的材料、人力资源、