多花野牡丹离体培养与再生体系的建立

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:guigui1998
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多花野牡丹(Melastoma affine)属野牡丹科野牡丹属常绿灌木,自然分布于福建、广东、云南、贵州、台湾等,适应性强,有较高的观赏价值,果实可以食用,全株可以药用,是一种有多种用途的野生植物。本论文以多花野牡丹的种子为基本材料,从无菌体系的建立、继代培养、生根诱导、炼苗移栽等各个环节展开技术研究:同时以多花野牡丹的叶片作为外植体,进行愈伤组织的诱导及愈伤组织的继代,从而为多花野牡丹的快速繁育奠定技术基础。主要研究结果如下:1多花野牡丹无菌体系的建立。以70%的乙醇消毒30s,无菌水冲洗2遍后,再用0.1%升汞浸泡7min,无菌水5遍冲洗,效果较好,可以使污染率控制在15%之内。2采用正交实验设计,考虑不同生长素对多花野牡丹小苗增殖的影响,筛选出一代培养基为MS+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L+6-BA1.0mg/L,30d后增殖数可以达到3.476;二次继代为MS培养基+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L+KT0.5mg/L+BA1.0mg/L,30d后增殖数为4.118,多次继代培养基为MS+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L+KT0.2mg/L+IBA0.3mg/L。3多花野牡丹小苗生根诱导。采用正交实验设计,考虑不同种类和浓度的生长素对多花野牡丹小苗生根的影响。筛选出最佳培养基为MS+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L+NAA0.2mg/L+IBA0.2meeL,30d后,生根率可达100%,生根长度可达8.83cm,生根数可达6.96条。4多花野牡丹组培苗的炼苗和移栽。分析不同基质对组培苗成活率的影响,结果表明沙子的成活率最高,达到85.0%。5多花野牡丹外植体的消毒和愈伤诱导。采集自然状态下生长的叶片,用70%乙醇浸泡20秒,无菌水冲洗两遍,0.1%升汞消毒8min,无菌水冲洗5遍,污染可以控制在20%之内,外植体诱导愈伤的培养基为基本培养基MS+琼脂6.0g/L+蔗糖20g/L+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,诱导率为46.7%。6不同光照强度对愈伤组织生长的影响。实验结果表明,暗培养条件下,愈伤组织易褐化:当光照强度为24001x时,愈伤组织生长旺盛。
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