浒苔多糖提取工艺及其降血脂和抗肿瘤功能研究

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目的:1.研究浒苔多糖提取工艺条件。2.研究浒苔多糖降血脂、抗脂质过氧化及对脂肪肝影响的作用及其机制。3.研究浒苔多糖抗肿瘤作用及其机制。方法:1.浒苔多糖(Enteromorpha’s polysaccharide,EP)提取工艺研究:采用水提醇沉法,以正交实验对提取液pH值、提取液温度、料液比及提取时间等4个因素的不同水平,以EP得率为指标进行优选。2.EP调节血脂、抗脂质过氧化功能的研究:以高脂饲料建立的高脂血症大鼠为实验对象,给予不同剂量的EP进行干预,通过测定血清总胆固醇(Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(High Density Lipoprotein Cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(Low Density Lipoprotein Cholesterol LDL-C)和动脉粥样硬化指数(Atherosclerosis,AI)来判断EP对大鼠血脂的影响。通过测定血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase ,GSH-PX)及丙二醛(maleic dialdehyde ,MDA)含量,并切片观察大鼠肝脏细胞的变化来判断EP对脂质过氧化和脂肪肝的影响,对其作用机制进行探讨。3.EP抗肿瘤生物活性的研究:以接种肿瘤细胞(H22)建立的移植瘤小鼠为实验对象,给予不同剂量EP进行干预,通过测定抑瘤率、脾脏指数和血清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor ,VEGF)及转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)含量、测定碳廓清指数和自然杀伤细胞(natural killer ,NK)活性对其抗肿瘤作用机制进行探讨。结果:1.EP提取的最适工艺条件: pH值5.0,料液比1:80,温度70℃,提取时间2小时,在该提取工艺条件下的多糖得率为9.48%。2. EP降血脂、抗脂质过氧化功能的研究:EP低、中、高剂量均可降低高脂血症实验大鼠的血清TC、TG、LDL-C(P<0.01);EP中、高剂量可降低AI(P<0.01)。提示EP有良好的降血脂作用。EP低、中、高剂量均可提高SOD和GSH-PX活性(P<0.01),减少MDA含量(P<0.01),提示EP有良好的抗脂质过氧化、降低高脂血症大鼠肝细胞脂肪变性程度的作用。3. EP抗肿瘤作用的研究:EP低、中、高剂量均可抑制肿瘤生长(P<0.01),抑瘤率分别为16.9%、49.1%和53.1%;EP低、中、高剂量均可提高小鼠的脾脏指数(P<0.01);EP高剂量可显著提高IL-2水平(P<0.01);EP低、中、高剂量均可显著降低TGF-β和VEGF水平(P<0.01)。EP中、高剂量可提高碳廓清指数(P<0.01),EP高剂量可显著提高NK细胞活性(P<0.01),提示EP有抗肿瘤作用。结论:采用水提醇沉法提取的EP为白色粉末,多糖含量为57.2%。EP对实验性高脂血症模型大鼠具有降血脂、抗脂质过氧化及预防脂肪肝作用。同时对实验性移植瘤模型小鼠的肿瘤生长具有抑制作用,其抑制机理可能与其影响机体IL-2、TGF-β和VEGF分泌以及机体非特异性免疫功能、NK细胞活性有关。因此EP作为保健食品新资源的开发利用潜力巨大。
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