目的：喉癌占全身癌肿的1％-5％。肿瘤的浸润与转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，也是影响预后的决定性因素，所以肿瘤转移标志物的研究成为近年来研究的热点。基质金属蛋白酶(MMPs)就是肿瘤转移的标志物之一。 MMPs是细胞分泌的一组Zn++依赖性蛋白酶，在生理环境中能达到其高活性，可消化细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)及基底膜(basementmembranes，BM)的所有成分。MMP-7是一种基质溶解酶，具有高度蛋白溶解能力及广泛的底物特异性，可激活多种ECM，并在肿瘤血管形成中发挥重要作用；MMP-9参与ECM的降解与重建，故义称基质因子。MMP-7和MMP-9的表达与肿瘤细胞的侵袭及转移呈正相关。MMPs存在特异性抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制剂(TissueInhibitorMetalloproteinase，TIMPs)。TIMPs可与MMPs形成1∶1复合体MMP-TIMP，从而抑制其活性。但到目前为止，关于TIMPs与肿瘤的发生、发展、侵袭与转移的关系，目前国内外的研究结果还不一致。有的研究表明TIMPs的表达水平与肿瘤的侵袭转移具有明显的负相关性，也有许多研究表明，TIMPs的超表达与恶性肿瘤的侵袭转移行为呈正相关。 本研究应用流式细胞术(FCM)检测喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中MMP-7、MMP-9及TIMP1的表达，探讨此三种蛋白在喉癌的发生、发展及转移过程中的作用及相关性，寻找可能预测喉癌的发生、转移及预后的肿瘤标志物，用以指导临床。 方法： 1.材料选择2004年11月-2005年11月，于河北医科大学附属第四医院耳鼻喉-头颈外科住院手术治疗的50例原发喉癌患者新鲜手术切除癌组织及50例相应癌旁组织(距肿瘤边缘0.5cm)与非喉部疾病患者的正常喉黏膜组织16例。所有组织取材后即用70％酒精固定，40c冷藏保存。 2.FCM方法一抗：鼠抗人基质金属蛋白酶7单克隆抗体(IgG2b)；羊抗人基质金属蛋白酶9单克隆抗体(C-20)；鼠抗人金属蛋白酶组织抑制因予1单克隆抗体(IgM)。二抗：羊抗鼠FITC-IgG抗体。 3.结果判定MMP-7、MMP-9及TIMP-1表达的蛋白定量分析：以荧光指数(FI)表示三种蛋白表达的相对含量。公式如下： 均道值=1ogX-mode×340FI=实验样品的均道值/对照样品的均道值 阳性结果的判定：肿瘤组织的FI值大于正常组织细胞的-XF1±2S为阳性(TIMP-1FI＞0.74，MMP-9＞1.06，MMP-7＞0.88)，反之为阴性。 4.统计方法所有数据经Excell数据库整理，应用SAS6.12统计软件包进行方差分析，Q检验，t、t’检验，X2检验，Fisher精确计算和多元回归分析。以P≤0.05为差异在统计学上有显著性意义，P≤0.01为差异在统计学上有非常显著性意义。 结果： 1MMP-9的表达 MMP-9在喉癌组织中的表达量(FI=1.24)明显高于癌旁组织(FI=1.05)(P=0.024)和正常粘膜组织(FI=1.00)(P=0.000)。喉癌组织中的阳性表达率(100％)也高于癌旁组织(72％)(P=0.001)和正常粘膜组织(0％)(P=0.000)，均具有非常显著性统计学差异；癌旁组织和正常喉粘膜组织间的表达差异无统计学意义(P=0.088)。 喉癌组织中，MMP-9在淋巴结转移组(N+)的表达量(FI=1.42)和阳性表达率(100％)与无淋巴结转移组(N0)(FI=1.17)(p=0.000)，(72％)(p=0.070)相比，N+组的表达量明显高于N0组，具有非常显著统计学差异，定性表达两组没有显著统计学意义；MMP-9在不同临床分期、临床分型、性别、年龄中的表达量和阳性表达率均无统计学差异。 2MMP-7的表达 MMP-7在喉癌组织中的表达量(FI=1.25)明显高于癌旁组织(FI=1.03)(P=0.000)及正常喉粘膜组织(FI=1.00)(P=0.000)，喉癌组织中的阳性表达率(80％)也高于癌旁组织(2％)，(P=0.001)和正常粘膜(0％)(P=0.001)均具有非常显著性统计学差异；癌旁组织和正常喉粘膜组织间的表达差异无统计学意义。 喉癌组织中，MMP-7在N+组的表达量(FI=1.31)和阳性表达率(100％)与N0组的表达量(FI=1.22)和阳性表达率(72％)相比，定量表达有非常显著的统计学差异(t=8.019，P=0.000)，N+组中表达量高于N0组，但阳性表达率两组无明显差异(X2=3.280，P=0.070)。MMP-7在不同临床分期、临床分型、性别、年龄中的表达量和阳性表达率均无统计学差异。 3TIMP-1的表达 TIMP-1在喉癌组织中的表达量(FI=0.85)及阳性表达率(56％)明显低于癌旁组织中的表达量(FI=0.97)(t=12.393，P=0.000)及阳性表达率(84％)(X2=9.333，P=0.002)和正常喉粘膜组织(FI=1.00)(t=-3.189，P=0.003)及阳性表达率(88％)(X2=5.198，P=0.023)，均具有非常显著统计学差异或显著统计学差异；癌旁组织和正常喉粘膜组织间的表达差异无统计学意义。 喉癌组织中，TIMP-1在N+组的表达量(FI=0.78)和阳性表达率(0％)与N0组的表达量(FI=0.88)及阳性表达率(78％)相比，N+组中表达量和阳性表达率均明显低于N0组。表达量有显著统计学差异(t=-1.9202，P=0.021)，阳性表达率有非常显著统计学差异(X2=24.747，P=0.001)。在临床Ⅰ、Ⅱ期组的表达量(FI=0.90)和阳性表达率(75％)与临床Ⅲ、Ⅳ期组(FI=0.75)和阳性表达率(22％)相比，表达量(t=-2.083，P=0.020)具有显著统计学差异，阳性表达率(X2=24.747，P=0.001)，具有非常显著统计学差异，临床Ⅲ、Ⅳ期组的表达量及阳性表达率明显低于临床Ⅰ、Ⅱ期组。TIMP-1在不同临床分型、性别、年龄中的表达量和阳性表达率均无统计学差异。 4以喉癌组织中MMP-9和MMP-7的表达为自变量，TIMP-1的表达为因变量，进行多元线性回归分析，三者间表达无相关性。 结论： 1MMP-9、MMP-7及TIMP-1在喉癌组织、癌旁组织及正常喉粘膜组织中均有表达。 2MMP-9、MMP-7在喉癌组织中的定量及定性表达均高于癌旁组织和正常喉粘膜组织，癌旁组织和正常喉粘膜组织的表达无差别。 3TIMP-1在喉癌组织中的定量及定性表达均低于癌旁组织和正常喉粘膜组织，癌旁组织和正常喉粘膜组织的表达无差别。 4TIMP-1在喉癌组织中的表达与淋巴结转移及临床分期有关，淋巴结转移组和临床Ⅲ、Ⅳ期组的定量及定性表达分别低于无淋巴结转移组和临床Ⅰ、Ⅱ期组；但其表达与临床分型、患者年龄几患者性别无关。 5MMP-9及MMP-7在喉癌组织中的定量表达与淋巴结转移有关，在有淋巴结转移组中的表达均高于无淋巴结转移组，定性表达在两组间均无差别；两者定量及定性表达与临床分期、临床分型、患者年龄及性别均无关。 6MMP-9、MMP-7、TIMP-1三者之间表达无相关。