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目的:
1.建立新生大鼠高氧肺损伤模型；2.了解高氧肺损伤急性期肺组织中c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)、TNF-α的转录和表达情况，以及在不同的时间点是否有差异?3.观察盐酸右美托咪啶对高氧肺损伤急性期JNK、TNF-α的转录和表达是否有影响?对高氧肺损伤急性期炎症反应是否有影响?
方法:
1.实验动物分组及动物模型建立：
72只3-5天左右的新生Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为4组：
空气对照组(Ⅰ)；高氧组(Ⅱ)；高氧+10倍临床剂量盐酸右美托咪啶(Dexmedetomidine)(Ⅲ)组；高氧+临床剂量盐酸右美托咪啶(Ⅳ)组，每组18只。再按实验时间点1、3、7天分为三个亚组，每个亚组6只。Ⅰ组置于空气中，其它三组置于高氧箱中，保持箱内氧气浓度在90-95％之间；Ⅲ组和Ⅳ组每天于同一时间点从腹腔注射药物盐酸右美托咪啶(江苏恒瑞医药股份有限公司)，前者剂量为5μg/kg，后者剂量为0.5μg/kg。
2.标本采集
于设定的时间点分别对四组实验动物采取断头法处死，打开胸腔迅速取出肺组织备检，其中左肺主要用于病理切片的组织学检测和细胞凋亡指数的检测；右肺组织用于JNK、TNF-αmRNA及其蛋白产物的检测，以及肺湿/干重比的检测。
3.病理学观测：
取左肺用于固定、包埋、病理切片，用于常规HE染色，观察肺组织病理学变化，并拍照存档。
4.肺湿/干重比检测：
取部分右肺组织称量后置于烤箱中测肺湿/干重比。
5.细胞凋亡指数检测：
取上述病理切片，用TUNEL法检测肺组织细胞凋亡指数，胞核呈现棕黄色为阳性细胞.每张切片随机选5个高倍镜(×400)非重叠视野，记数每个视野的凋亡指数(阳性细胞数/总细胞数×100％)。
6.JNK、TNF-α蛋白检测(Western Blot法)：
取少量大鼠右肺，双蒸水沈去血，滤纸吸干，-80℃冻存，提取总蛋白后以WesternBlot法检测NK、TNF-α蛋白的量，并分别与空气对照组比较。
7.JNK、TNF-αmRNA检测(RT-PCR方法)：
肺组织总RNA提取后，以RT-PCR方法检测JNK、TNF-α mRNA，并分别与空气对照组比较。
结果:
1.一般情况
Ⅰ组实验动物精神状态佳、活动灵活，呼吸平稳，，体重增长稳定。Ⅱ组实验动物精神状态差、行为迟钝、活动少，呼吸急促，体重增长差。Ⅲ组实验动物精神状态尚佳、活动尚灵活，呼吸稍促，体重增长尚理想，但不如空气组。Ⅳ组实验动物精神欠佳，呼吸促，活动不灵活，体重增长欠佳。
2.肺组织病理观察
2.1大体观察
Ⅰ组两肺色泽红润，富有弹性，质软；Ⅱ组两肺苍白水肿，部分肺叶有出血，质地较韧。Ⅳ组同Ⅱ组相比变化不明显；Ⅲ组两肺在充血水肿的基础上有少许苍白水肿，少许肺叶出血，质地中。
2.2肺组织病理切片
Ⅰ组肺泡结构完整，大小较均匀，肺泡间隔增多、变薄，肺泡数目多；Ⅱ、Ⅳ组肺泡数目明显减少，肺泡体积增大、间隔增宽，肺间隔断裂，肺组织结构紊乱，毛细血管扩张、充血明显，炎症细胞浸润严重，肺泡腔内可见较多的粉色渗出液。Ⅲ组光镜下病理组织学改变介于Ⅰ组和Ⅱ组之间。
3.肺组织细胞凋亡指数的变化：
实验3d、7d时，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肺组织细胞凋亡指数均较Ⅰ组明显升高(P<0.05)，但Ⅲ组较Ⅱ、Ⅳ组低(P<0.05)；Ⅳ组与Ⅱ组差异不大(P>0.05)。
4.肺组织湿干重比值(W/D)：
实验1d时，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组W/D无明显差异(P>0.05)。
实验3d、7d时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组W/D均较Ⅰ组明显升高(P<0.05)但Ⅲ组较Ⅱ、Ⅳ组低(P<0.05)；Ⅳ组与Ⅱ组差异不大(P>0.05)。
5.JNK、TNF-αmRNA及其蛋白产物在各组肺组织中的表达：
5.1 TNF-αmRNA及蛋白变化：
实验1d、3d、7d时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肺组织中TNF-αmRNA和蛋白均较Ⅰ组明显升高(P<0.05)，且随时间的延长增高趋势加大；但Ⅲ组较Ⅱ、Ⅳ组低(P<0.05)；Ⅳ组与Ⅱ组差异不大(P>0.05)。
5.2 JNK mRNA及蛋白变化：
实验1d、3d、7d时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组肺组织中JNK mRNA和蛋白均较Ⅰ组明显升高(P<0.05)，且随时间的延长增高趋势加大；但Ⅲ组较Ⅱ、Ⅳ组低(P<0.05)；Ⅳ组与Ⅱ组差异不大(P>0.05)。
结论:
1.长期的吸入高浓度氧能导致新生大鼠的急性肺损伤，病理表现为毛细血管扩张、充血，肺泡上皮细胞肿胀，肺泡间质肿胀，炎症细胞浸润，以中性粒细胞为主，肺泡数目明显减少，肺泡体积增大、间隔增宽，较多的肺间隔断裂，肺组织结构紊乱，肺泡腔内可见较多的粉色渗出液。
2.JNK、TNF-α蛋白和mRNA在新生大鼠高氧肺损伤时早期(1天)即有高表达，且随时间的延长增高趋势加大，7天时表达最强，提示其在高氧肺损伤早期及其病程进展过程中有重要的作用。
3.盐酸右美托咪啶可以下调高氧肺损伤时JNK、TNF-α的转录和表达，并呈剂量依赖效应，大剂量盐酸右美托咪啶可以明显减轻肺部炎症反应和肺水肿，从而对高氧肺损伤有一定的保护作用。