论文部分内容阅读
研究背景肝硬化门静脉高压的常见并发症主要包括食管胃底静脉曲张和顽固性腹水,是肝硬化患者死亡的主要原因,目前国内外相关指南提供的治疗方法以内科手段为主。但近年来,经颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPS)逐渐成为治疗肝硬化门静脉高压相关并发症的有效方法之一。TIPS术通过微创的方式在门静脉与肝静脉之间的肝实质内建立分流道,将门静脉血直接分流至腔静脉,从而降低门静脉压力。虽然TIPS术治疗肝硬化门静脉高压并发症效果显著,但其在临床中的施行仍存在争议,因为术后肝功能损伤和肝性脑病使患者生存率并未得到改善。分流道在降低门静脉压力的同时不可避免会减少肝内血流灌注,损伤肝功能。如何增加肝内血流灌注、改善肝功能,是目前肝硬化门静脉高压TIPS术治疗后需要解决的问题之一。既往相关研究报道,血小板活化及释放的细胞因子可影响肝功能及肝硬化进程,其中血小板活化释放的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)可能有利于肝功能,而血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)则可能损害肝功能,这可能主要与肝内血管生成有关。另外,肝硬化门静脉高压可使外周血中的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)浓度升高,而LPS在肝硬化门静脉高压患者的血小板活化中起到关键作用。TIPS可有效降低门静脉压力,而血浆LPS浓度是否会随门静脉压力下降而发生变化,从而影响血小板的活化与释放分泌。目的本研究主要是分析肝硬化门静脉高压失代偿期患者血浆LPS、VEGF、TSP-1浓度与不同肝功能的相关性,同时着重探讨TIPS术后能否通过降低肝硬化门静脉高压失代偿期患者门静脉压力以及血浆LPS浓度,改变血小板活化状态及其相关细胞因子VEGF和TSP-1的释放,从而影响患者术后肝功能转归。材料与方法本研究共纳入肝硬化门静脉高压失代偿期患者169例(其中81例接受TIPS术治疗)以及健康正常人20例。(1)使用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测不同Child-Pugh分级肝硬化患者外周血浆LPS、VEGF、TSP-1浓度及血小板计数。(2)在体外将正常人血小板与不同浓度LPS预孵育并使用胶原刺激后,分别使用FCM及ELISA检测血小板活化程度(CD62P和PAC-1阳性率),以及VEGF和TSP-1浓度。(3)使用FCM检测31例TIPS患者术前术后血小板CD62P和PAC-1阳性率,以及血浆血小板微粒浓度。(4)使用ELISA检测50例TIPS患者术前术后外周血浆LPS、VEGF和TSP-1浓度。(5)分析TIPS术后患者血浆LPS、VEGF及TSP-1浓度变化与Child-Pugh评分变化的关系。结果1、不同Child-Pugh分级肝硬化门静脉高压失代偿期患者具有不同血浆LPS、VEGF、TSP-1浓度及血小板计数;Child-Pugh C级患者血浆LPS及TSP-1浓度均显著高于Child-Pugh A、B级患者(P<0.01),Child-Pugh C级患者血浆VEGF浓度及血小板计数均显著低于Child-Pugh A、B级患者(P<0.01)。肝硬化门静脉高压失代偿期患者的血浆LPS、VEGF和TSP-1浓度以及血小板计数均与Child-Pugh评分呈相关性。2、体外实验:LPS浓度越高,血小板CD62P和PAC-1阳性率就越高,血小板释放的TSP-1浓度就越高,但血小板释放的VEGF无显著差异。3、TIPS术后门静脉压力梯度、血浆LPS浓度、血小板CD62P和PAC-1阳性率及血浆血小板微粒浓度较术前均显著降低(P<0.01)。4、患者TIPS术后7天的血浆LPS和TSP-1浓度显著升高,但于术后1个月以后持续下降并显著低于术前水平;患者TIPS术后7天的血浆VEGF浓度无显著变化,但于术后1个月以后持续升高并显著高于术前水平。其中,血浆LPS浓度分别与血浆TSP-1浓度呈正相关、与血浆VEGF浓度呈负相关。5、TIPS术后患者血浆VEGF浓度升高幅度越大、TSP-1浓度下降幅度越大,则Child-Pugh评分升高幅度越小。结论肝硬化门静脉高压失代偿期患者血浆LPS、VEGF及TSP-1浓度水平与其肝功能存在相关性,其中LPS与TSP-1可能为负性因子,VEGF可能为正性因子。肝硬化门静脉高压失代偿期患者TIPS术后门静脉梯度压力及血浆LPS浓度下降,相应的血小板活化下降,血小板释放TSP-1减少、释放VEGF增多,从而有可能减轻由门静脉血分流导致的肝功能损伤。