白癜风是较常见的色素脱失性疾病，其中非节段型白癜风的发病机制与自身免疫功能异常有关。近来，CD8~+T细胞在白癜风发病机制中的作用受到重视，而T细胞从外周循环归巢至皮肤发挥功能并不是一个随机过程，皮肤淋巴细胞归巢抗原（Cutaneous Lymphocyte-associated Antigen, CLA）是效应性T细胞表面重要的皮肤归巢分子，可介导效应性T细胞从外周血向皮肤归巢。新近的研究提示皮肤归巢的CD8~+T细胞（CLA~+CD8~+T细胞）可能是白癜风致病的自身反应性细胞。调节性T细胞（regulatory T cell, Treg）是近年发现的具有免疫抑制功能T细胞亚群，对于维持机体免疫动态平衡具有至关重要的作用，越来越多的证据显示Treg的抑制功能下降，是自身反应性细胞激活的重要因素，我们推测非节段型白癜风患者外周血Treg对自身反应性细胞抑制功能下降参与了白癜风的发病机制。对于白癜风的治疗尚无特效疗法，中药治疗白癜风的历史悠久，但治疗机理有待研究，在有免疫调节作用的中药有效成分中找到对白癜风自身反应性CLA~+CD8~+T细胞具有抑制作用中药单体，旨在为临床上应用和推广提供实验依据，是目前研究的一个新方向。目的：1.检测非节段型白癜风患者外周血CD8~+T细胞、CLA~+CD8~+T细胞的数量，并分析其杀伤功能相关蛋白穿孔素、颗粒酶B、FasL以及归巢相关趋化因子受体CCR4（C-C chemokine receptor4）、CCR10的表达2.分析白癜风患者外周血Treg对自身皮肤归巢的CD8~+T细胞抑制功能是否下降及Treg功能性调节分子的表达。3.探究具有免疫调节作用的中药单体对白癜风患者皮肤归巢的CD8~+T细胞是否具有抑制作用，并初步探讨其作用机制。方法：1.对非节段型白癜风患者进展期15例、稳定期12例，正常人15例，采用流式细胞术，检测外周血CD8~+T细胞、CLA~+CD8~+T细胞的数量，并分析其杀伤功能相关蛋白穿孔素、颗粒酶B、FasL以及归巢相关趋化因子受体CCR4、CCR10的表达。2.对非节段型白癜风患者进展期7例、稳定期6例，正常人6例，采用流式细胞术检测外周血Treg功能性调节分子的表达。通过免疫磁珠法分选外周血CD8~+T细胞和Treg，根据CFSE（carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester）标记技术，采用流式细胞术检测外周血CLA~+CD8~+T细胞的增殖能力，并分析Treg对自身CLA~+CD8~+T细胞增殖的抑制能力。3.以9例非节段型进展期白癜风患者为研究对象，对文献报道能抑制T细胞功能且所属中药在古中医方剂中被用于治疗白癜风的中药单体，包括芹黄素、汉黄芩素、山奈酚、芍药苷和京尼平苷，通过免疫磁珠法分选外周血CLA~+CD8~+T细胞，采用CCK-8法检测这些中药单体对于外周血CLA~+CD8~+T细胞无杀伤毒性浓度范围，进而在此浓度范围内研究这些中药单体对外周血CLA~+CD8~+T细胞的抑制功能，并初步探讨其作用机制。结果：1.进展期白癜风外周血CLA~+CD8~+T细胞数量及功能检测1）外周血CD8~+T细胞的数量在白癜风进展期、稳定期和对照组之间无明显差异；CD8~+T细胞穿孔素、颗粒酶B和FasL的表达在三组间均无明显差异。2）外周血CLA~+CD8~+T细胞的数量在进展期明显高于稳定期和对照组，且在进展期的数量与白癜风面积及严重程度评分（Vitiligo Area Scoring Index, VASI）正相关；CCR4在CD8~+T细胞的表达在进展期明显高于稳定期和对照组，而CCR10的表达在三组间无明显差异。3）外周血CLA~+CD8~+T细胞穿孔素、颗粒酶B的表达在白癜风进展期明显高于稳定期和对照组，FasL的表达在三组间无明显差异；CCR4和CCR10在CLA~+CD8~+T细胞的表达在三组间均无明显差异。2.进展期白癜风患者外周血Treg对自身CLA~+CD8~+T细胞抑制功能检测1）外周血Treg表达功能性调节分子细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxicT lymphocyte-associated antigen-4, CTLA-4）水平在进展期明显高于稳定期和对照组，而表达淋巴细胞活化基因-3分子（lymphocyte activation gene-3, LAG-3）、CD39和CD73水平在三组间无明显差异。2）外周血CLA~+CD8~+T细胞的增殖能力在三组间无明显差异。3）外周血Treg对于自身CLA~+CD8~+T细胞的抑制能力在白癜风进展期明显低于稳定期和对照组。3.具有免疫调节作用的中药单体对CLA~+CD8~+T细胞抑制功能检测1）芹黄素可抑制进展期白癜风患者外周血CLA~+CD8~+T细胞增殖，而汉黄芩素、山奈酚、芍药苷和京尼平苷无明显抑制作用。2）芹黄素可抑制白癜风CLA~+CD8~+T细胞分泌IL-2，但对IFN-γ和TNF-α无明显抑制作用。3）芹黄素能够诱导白癜风CLA~+CD8~+T细胞周期停滞在G0/G1期。结论：1.非节段型进展期白癜风患者外周血CLA~+CD8~+T细胞数量增加，杀伤功能相关蛋白穿孔素、颗粒酶B的表达增强，提示CLA~+CD8~+T细胞是白癜风的自身反应性细胞并参与了白癜风的发病机制。2.非节段型进展期白癜风患者外周血Treg对自身CLA~+CD8~+T细胞抑制功能下降，可能与CLA~+CD8~+T细胞数量增加有关。3.芹黄素对非节段型进展期白癜风患者外周血激活的CLA~+CD8~+T细胞具有抑制作用，从免疫学发病机制方面为芹黄素用于白癜风的治疗提供了实验依据。