中药刺五加和麻黄的毛细管电泳指纹图谱研究

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中药指纹图谱从整体观出发,对中药内在质量进行评估,为中药质量控制提供了有力的依据。但是,指纹图谱研究不应只停留在中药质量控制的层面上,而是应该考虑如何利用指纹图谱既有共性又有个性的特点,与中药组分在体内的代谢动力学、药理学的研究相联系,从整体的角度研究中药的作用机制,从而突破中药指纹图谱原有的概念,拓展其应用领域。本文以毛细管电泳为技术手段,进行了中药指纹图谱研究。首先,建立了刺五加微乳液毛细管电动色谱指纹图谱,对刺五加的质量控制进行了探讨;其次,通过模拟胃肠道条件和刺五加组分与生物膜的相互作用,根据刺五加的指纹图谱,初步预测了刺五加提取物在体内的吸收状况;以受-配体相互作用理论为指导,以指纹图谱的形式考察了麻黄有效成分麻黄碱及麻黄提取物与生物大分子的相互作用,对麻黄的某些药理机制进行了初步探讨。研究的主要内容如下:1)比较了CZE、MEKC和MEEKC三种电泳模式对刺五加提取物分离,结果表明MEEKC对刺五加提取物中的复杂组分具有很好的分离能力;选取超声提取法作为刺五加组分的提取方法;以刺五加提取物电泳谱图的峰数为指标,确定指纹图谱的MEEKC运行介质条件为1.0 %(w/w)SDS,6.6 %(w/w)正丁醇,0.7 %(w/w)正庚烷,25 mmol/L硼砂溶液(91.6 %,w/w,pH 9.5)的微乳液,建立了刺五加MEEKC指纹图谱,确定了12个共有峰,方法精密度、稳定性、重现性,符合建立指纹图谱的要求;对6个产地的刺五加MEEKC指纹图谱进行比较,结果表明不同产地刺五加提取物中组分种类相似、但含量有差异。2)以模拟人体胃肠道内生理环境的10 mmol/L的磷酸盐溶液(pH分别为4.0、5.4、6.2、7.0、8.5、9.3)为毛细管电泳的运行缓冲液,得到了刺五加提取物的不同电泳行为,并将刺五加提取物电泳行为的变化作为指纹图谱对其在机体消化道内的解离情况进行了阐述,并说明了其吸收状况的理由。3)对比CZE、MEKC、MEEKC三种模式电泳行为,可以从峰形的变化中在组分荷电不变的情况下,由于自身的疏水性质,在胶束、微乳液中分配行为的差异,导致组分电泳行为的差异,在MEEKC中组分可以部分地分离甚至基线分离,则说明刺五加提取物组分间的疏水性差异较大,穿越生物膜的能力差异较大,某些组分可能不能跨跃生物膜,进入细胞,引发生理作用。4)以麻黄碱与BSA、α1-肾上腺素受体的相互作用为基础,建立了麻黄毛细管电泳指纹图谱评价麻黄多组分与生命大分子的相互作用。通过麻黄指纹图谱,初
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