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背景食管癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,我国食管癌患者的死亡率为15.15/10万人[1],5年生存率仅5%~10%,其中95%的临床病理学特征为鳞癌。死亡的重要因素是早期即出现侵袭和转移,其作用机制仍不明确,涉及到肿瘤细胞与宿主之间的相互作用,可能与多种基因及蛋白质的表达相关。热休克蛋白是一类高度进化保守的应激蛋白,可被多种刺激诱导合成产生,如肿瘤、缺氧和其他化学刺激。其参与肿瘤发生、发展、免疫逃逸、治疗及预后等过程。近年来,大量研究表明热休克蛋白家族中的HSP32、HSP27,可能参与了多种肿瘤的发生发展过程,然而关于HSP32、HSP27在食管鳞癌侵袭转移中的作用并未见报道。目的研究热休克蛋白HSP32、HSP27在食管鳞癌侵袭转移中的作用。方法1.免疫组织化学方法检测食管鳞癌组织中HSP32、HSP27的表达,并分析其与临床病理资料的相关性;2.利用体外细胞划痕、Transwell实验检测食管鳞癌高低转移细胞亚系转移潜能的差异;3.Western blot和q RT-PCR测定HSP32、HSP27在食管鳞癌不同转移潜能细胞亚系中表达水平的变化,分析HSP32、HSP27在食管鳞癌侵袭转移中的作用;4.利用慢病毒转染技术上调HSP27在高转移潜能细胞亚系中的表达水平,通过体外Transwell、细胞划痕实验及体内裸鼠转移实验,观察HSP27上调后食管鳞癌细胞侵袭转移能力的变化;结果1.HSP32在食管鳞癌组织中呈高表达,其阳性表达率与肿瘤分化程度(P=0.039)、浸润程度T分期(P=0.020)、淋巴结转移(P=0.017)、淋巴管浸润(P=0.037)、远处转移(P=0.038)有显著相关性;HSP27在食管鳞癌组织中表达水平降低,其表达与肿瘤分化密切相关(P=0.023),与TNM分期(P=0.013),淋巴结转移(P=0.020)和远处转移(P=0.017)有关,而与性别(P=0.752)和患者的年龄(P=0.771)无显著相关性;2.EC9706-H、EC109-H细胞亚系侵袭转移能力高;EC9706-L、EC109-L细胞亚系侵袭转移能力低;3.HSP32在两对高转移潜能细胞亚系中表达水平较相应的低转移细胞亚系表达升高;HSP27在两对高转移潜能细胞亚系中表达水平较相应的低转移细胞亚系表达降低;4.利用慢病毒转染技术特异性上调了高转移潜能细胞亚系中HSP27的表达水平,细胞划痕实验和Transwell实验证实其侵袭转移能力下降;5.体内裸鼠转移实验证实,在高转移潜能细胞亚系中上调HSP27表达后,食管鳞癌细胞的体内侵袭和转移能力下降;结论1.HSP32、HSP27与食管鳞癌的侵袭转移密切相关,但不同蛋白所起的作用并不相同。HSP32的表达水平与食管癌淋巴结转移呈正相关,HSP27的表达水平与食管鳞癌淋巴结转移呈负相关;2.上调HSP27表达水平后,能在体内外抑制食管鳞癌细胞EC9706-H及EC109-H的侵袭和转移能力;