目的:醛固酮参与了肾脏疾病的发生发展,但醛固酮介导糖尿病小鼠肾脏损害的机制尚不完全清楚。方法:醛固酮和/或盐皮质激素受体拮抗剂(MRA)依普利酮干预糖尿病小鼠(db/db)或近端小管上皮细胞(PTECs):检测肾脏/PTECs的损伤;提取来源于PTECs的细胞外囊泡(EVs)干预成纤维细胞,并对EVs做miRNA芯片分析。提取肾脏来源的EVs干预正常小鼠,检测肾脏的损伤。检测糖尿病伴或者不伴糖尿病肾病(DKD)患者血清和肾脏样品miR-196b-5p表达。结果:我们发现醛固酮能促进db/db糖尿病小鼠蛋白尿和肾小管间质细胞外基质(ECM)的积累,而依普利酮能减轻醛固酮的不良反应。然而,PTECs和成纤维细胞的共培养发现,当PTECs衍生的细胞外囊泡被成纤维细胞吸收时,ECM的产生显著增加。此外,经醛固酮处理的肾皮质注射EVs的C57BL/6小鼠显示ECM积累增加。我们分析了PTECs分泌的EVs的功能,鉴定出RNAs与EVs诱导的成纤维细胞功能障碍有关。进一步的miRNA芯片分析显示,在醛固酮刺激的PTECs来源的EVs中,miR-196b-5p是升高最显著的miRNA。成纤维细胞中miR-196b-5p的过表达增加了ECM的产生,同时抑制了SOCS2的表达并增强了STAT3的磷酸化。此外,有DKD的患者血清miR-196b-5p水平高于无DKD的患者,而miR-196b-5p水平与白蛋白尿浓度呈正相关。在糖尿病患者的肾脏标本中,miR-196b-5p的表达(主要分布于PTECs中)在DKD患者中较非DKD升高。结论:本研究证实miR-196b-5p-EVs通路参与了醛固酮诱导的糖尿病肾纤维化的新机制。富含miR-196b-5p的EVs在肾纤维化过程中介导PTECs与成纤维细胞之间的相互作用,可能与STAT3/SOCS2信号通路有关。