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目的：以单纯收缩期高血压并脑梗死患者为研究对象，初步总结其中医证候分布规律；基于临床研究结果，筛选相关证型人群的血浆特征lncRNA表达谱，构建lncRNAs-mRNAs共表达网络，探讨lncRNA在单纯收缩期高血压并脑梗死相关证型中的潜在作用和可能作用机制。
方法：
1.临床研究收集并分析149例单纯收缩期高血压并脑梗死患者的临床资料，对四诊资料等运用量表进行全面采集，通过聚类分析和对应分析的方法，总结中医证候特征，并分析各证型血糖、血脂、尿酸、同型半胱氨酸等因素的相关性。
2.实验研究根据前期临床研究结果，使用高通量测序技术检测单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者与对照组单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者血浆lncRNAs、mRNAs的表达水平，筛选差异表达lncRNA和mRNA。通过生物信息学预测分析差异表达的lncRNAs靶向调控的mRNAs。对筛选出的部分lncRNA，扩大样本量，纳入前期符合临床研究的60名受试者，进行qT-PCR验证。
结果：
1.临床研究发现单纯收缩期高血压并脑梗死的中医证候分布：149例单纯收缩期高血压并脑梗死患者中医证候分布情况为肾虚血瘀证最多，占比42.95%，其次为肝肾阴虚证、肝火亢盛证、痰热腑实证、风痰阻络证，分别占比23.49%，18.79%，7.38%，7.38%。各证型之间的年龄分布没有统计学差异。各证型在不同性别间的分布结果显示肝肾阴虚与痰热腑实在男女占比有统计学差异(卡方值=7.6215P=0.005)，肝肾阴虚女性占比高，痰热腑实男性占比高。血清尿酸单因素方差分析P=0.05，LSD检验方法两两比较后，t分组结果显示肝肾阴虚证与风痰阻络证有差异，风痰阻络证血清尿酸水平高于肝肾阴虚证血清尿酸水平。各证型的BMI、低密度脂蛋白均升高，但无统计学意义。血糖在肝肾阴虚证中提示升高，同型半胱氨酸在痰热腑实证和风痰阻络证中升高，但各证型间无明显统计学意义。
2.实验研究使用高通量测序技术和生物信息学分析方法，发现单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者与对照组单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者血浆存在2768个差异lncRNAs(946个上调，1822个下调)，747个差异mRNAs(228个上调，519个下调)。对高通量测序筛选的差异表达lncRNA和mRNA(FC值在2倍以上且P＜0.05)进行聚类分析，和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者相比，单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者血浆lncRNAs和mRNAs表达谱存在明显差异。
3.LncRNA可以在转录水平调控靶基因的表达，采用生物信息学分析预测差异表达lncRNA的靶mRNA。交集基因进行GO和KEGG富集分析，结果显示交集基因主要与血小板活化聚集、ECM受体相互作用、细胞粘附分子、黏着斑等相关。瘀血是单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者的主要致病因素，结合富集分析结果和疾病致病因素的病理表现，提示脑梗死与凝血异常、血小板聚集和细胞粘附密切相关。
4.结合差异表达lncRNA-mRNA共表达网络、差异表达lncRNA和mRNA富集分析结果，筛选与单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证相关的特定lncRNA和mRNA。qT-PCR结果显示，可能存在调控关系的lncRNA和mRNA为：ENST00000565493(上调)、ENST00000606054(上调)、ENST00000590604(上调)、ENST00000566942(上调)、NONHSAT217189.1(下调)和CD226(上调)；ENST00000565493(上调)、NONHSAT138949.2(上调)、ENST00000369385(下调)、ENST00000540082(下调)和PARVB(上调)。
5.同型半胱氨酸和血清肌酐在单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证(实验组)和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证(对照组)间存在显著性差异，提示同型半胱氨酸和血清肌酐与脑梗死相关。回归分析结果表明，血清尿酸和脂蛋白(α)与差异特定lncRNA和mRNA存在线性关系。
结论：
1.单纯收缩期高血压并脑梗死可分为肾虚血瘀证、肝肾阴虚证、肝火亢盛证、痰热腑实证、风痰阻络证5个基本证候，其中肾虚血瘀证是主要证候。结合理化指标分析，风、热、痰、瘀是致病因素，其中瘀是单纯收缩期高血压并脑梗死的最关键病理因素。同时应用聚类分析能够使数据更加客观，有利于中医证候的分类研究。
2.单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证之间有较明显的转录组表达谱差异。GO富集分析和KEEG富集分析提示，单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证差异表达的lncRNA和mRNA主要与凝血调节、血小板活化聚集、焦点粘连、细胞粘附分子结合等信号通路相关。筛选到的5个上调lncRNA和3个下调lncRNA可能通过调控CD226和PARVB的表达，参与血小板聚集和细胞粘附信号通路，影响单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证的发生发展。为单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证的分子和病理机制提供了一定的理论依据。
方法：
1.临床研究收集并分析149例单纯收缩期高血压并脑梗死患者的临床资料，对四诊资料等运用量表进行全面采集，通过聚类分析和对应分析的方法，总结中医证候特征，并分析各证型血糖、血脂、尿酸、同型半胱氨酸等因素的相关性。
2.实验研究根据前期临床研究结果，使用高通量测序技术检测单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者与对照组单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者血浆lncRNAs、mRNAs的表达水平，筛选差异表达lncRNA和mRNA。通过生物信息学预测分析差异表达的lncRNAs靶向调控的mRNAs。对筛选出的部分lncRNA，扩大样本量，纳入前期符合临床研究的60名受试者，进行qT-PCR验证。
结果：
1.临床研究发现单纯收缩期高血压并脑梗死的中医证候分布：149例单纯收缩期高血压并脑梗死患者中医证候分布情况为肾虚血瘀证最多，占比42.95%，其次为肝肾阴虚证、肝火亢盛证、痰热腑实证、风痰阻络证，分别占比23.49%，18.79%，7.38%，7.38%。各证型之间的年龄分布没有统计学差异。各证型在不同性别间的分布结果显示肝肾阴虚与痰热腑实在男女占比有统计学差异(卡方值=7.6215P=0.005)，肝肾阴虚女性占比高，痰热腑实男性占比高。血清尿酸单因素方差分析P=0.05，LSD检验方法两两比较后，t分组结果显示肝肾阴虚证与风痰阻络证有差异，风痰阻络证血清尿酸水平高于肝肾阴虚证血清尿酸水平。各证型的BMI、低密度脂蛋白均升高，但无统计学意义。血糖在肝肾阴虚证中提示升高，同型半胱氨酸在痰热腑实证和风痰阻络证中升高，但各证型间无明显统计学意义。
2.实验研究使用高通量测序技术和生物信息学分析方法，发现单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者与对照组单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者血浆存在2768个差异lncRNAs(946个上调，1822个下调)，747个差异mRNAs(228个上调，519个下调)。对高通量测序筛选的差异表达lncRNA和mRNA(FC值在2倍以上且P＜0.05)进行聚类分析，和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证患者相比，单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者血浆lncRNAs和mRNAs表达谱存在明显差异。
3.LncRNA可以在转录水平调控靶基因的表达，采用生物信息学分析预测差异表达lncRNA的靶mRNA。交集基因进行GO和KEGG富集分析，结果显示交集基因主要与血小板活化聚集、ECM受体相互作用、细胞粘附分子、黏着斑等相关。瘀血是单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证患者的主要致病因素，结合富集分析结果和疾病致病因素的病理表现，提示脑梗死与凝血异常、血小板聚集和细胞粘附密切相关。
4.结合差异表达lncRNA-mRNA共表达网络、差异表达lncRNA和mRNA富集分析结果，筛选与单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证相关的特定lncRNA和mRNA。qT-PCR结果显示，可能存在调控关系的lncRNA和mRNA为：ENST00000565493(上调)、ENST00000606054(上调)、ENST00000590604(上调)、ENST00000566942(上调)、NONHSAT217189.1(下调)和CD226(上调)；ENST00000565493(上调)、NONHSAT138949.2(上调)、ENST00000369385(下调)、ENST00000540082(下调)和PARVB(上调)。
5.同型半胱氨酸和血清肌酐在单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证(实验组)和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证(对照组)间存在显著性差异，提示同型半胱氨酸和血清肌酐与脑梗死相关。回归分析结果表明，血清尿酸和脂蛋白(α)与差异特定lncRNA和mRNA存在线性关系。
结论：
1.单纯收缩期高血压并脑梗死可分为肾虚血瘀证、肝肾阴虚证、肝火亢盛证、痰热腑实证、风痰阻络证5个基本证候，其中肾虚血瘀证是主要证候。结合理化指标分析，风、热、痰、瘀是致病因素，其中瘀是单纯收缩期高血压并脑梗死的最关键病理因素。同时应用聚类分析能够使数据更加客观，有利于中医证候的分类研究。
2.单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证和单纯收缩期高血压肾虚血瘀证之间有较明显的转录组表达谱差异。GO富集分析和KEEG富集分析提示，单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证差异表达的lncRNA和mRNA主要与凝血调节、血小板活化聚集、焦点粘连、细胞粘附分子结合等信号通路相关。筛选到的5个上调lncRNA和3个下调lncRNA可能通过调控CD226和PARVB的表达，参与血小板聚集和细胞粘附信号通路，影响单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证的发生发展。为单纯收缩期高血压并脑梗死肾虚血瘀证的分子和病理机制提供了一定的理论依据。