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目的：滤泡型辅助性T细胞（follicular helper T cells，Tfh cells）是最近发现的CD4+辅助性T淋巴细胞亚群，其发生、分化和功能均独立于以往的Thl、Th2、Thl7和Treg细胞，主要作用是辅助B细胞产生抗体，其主要表面标志物为CXCR5，为Tfh细胞的表面趋化因子受体。Tfh细胞在CXCR5的配体—滤泡树突状细胞产生的CXCL3（即人B淋巴细胞趋化因子1，BLC-1）的趋化吸引下定位于生发中心（germinal centers, GC）与B细胞相互接触，促进B细胞的增殖、分化、免疫球蛋白类别转换，从而参与免疫应答。其转录因子Bcl-6，主要效应因子IL-21在B细胞的分化过程中也起着重要作用。普遍认为干燥综合征是B淋巴细胞增殖性疾病。关于Tfh细胞在干燥综合征中的致病作用国外偶有研究报道，但国内尚无这方面研究。本课题旨在应用免疫组织化学的方法检测唇腺组织中CXCR5、IL-21的表达，采用TUNEL法检测唇腺组织中细胞凋亡情况，初步探讨Tfh细胞在干燥综合征病人唇腺组织中的表达、定位及生物学功能。材料与方法：选择2011年3月至2012年12月在河北医科大学第二医院免疫风湿科原发性干燥综合征患者15例作为疾病组，其中包括继发肺组织纤维化患者4例，肾小管酸中毒患者2例，免疫性血小板减少患者2例，无系统损害的患者7例。所有病人在唇腺活检术前未经治疗。另选择口腔外科黏液腺囊肿、下唇外伤等非自身免疫性疾病患者11例作为对照组。所有研究对象唇腺组织标本均由4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，HE染色，免疫组织化学方法检测所有标本中CXCR5、IL-21的表达，显微镜下观察两组间CXCR5、IL-21的表达、定位的差异及其与淋巴细胞、浆细胞的浸润，GC形成情况的相关性。TUNEL法检测唇腺组织中细胞凋亡情况，显微镜下计数阳性细胞数。在组织切片中，计数5个高倍镜视野中的阳性细胞数目，并据阳性细胞数比例＜1%，1%-25%，26%-50%，51%-75%，＞75%分别计为0分，1分，2分，3分，4分；根据染色强度分为染色强度弱、中、强三个等级，分别记为1分，2分，3分，阳性细胞数目比例评分×染色强度评分为每例标本最后综合计分，综合记分≥1为表达阳性，<1则为阴性[4]。根据Chisholm唇腺病理分级标准，将所有标本分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个等级，分别代表少量淋巴细胞浸润、中等量淋巴细胞浸润、一个淋巴细胞灶浸润、多个淋巴细胞灶浸润。采用SPSS13.（0SPSS Company,Chicago，Illinois，USA）版统计软件进行统计分析，数据用x s表示，两组间比较采用两个独立样本的t检验；多组间CXCR5、IL-21表达的比较用方差分析，等级资料间的比较用秩和检验，两变量间相关性分析采用pearson相关系数，两等级资料间相关性分析采用spearman相关系数，以检验水准α=0.05，P＜0.05为有统计学意义。结果：1光镜下观察，正常对照组唇腺组织腺泡大小均匀，导管排列整齐，无扩张，间质无或少量炎性细胞浸润；疾病组腺泡大小不等，部分腺体萎缩，以导管周围为明显，间质有1个或多个灶性淋巴细胞浸润。2疾病组与对照组CXCR5表达水平分别为（4.27±1.49）分、（2.00±1.10）分，二者差异的比较有统计学意义（P=0.000），导管细胞及其周围淋巴细胞均可检测到CXCR5的表达，腺泡细胞未检测到阳性细胞，CXCR5的表达与病理分级相关（P=0.000，r=0.816），提示CXCR5的表达与淋巴细胞灶的多少有关。3疾病组与对照组IL-21表达水平分别为（3.60±2.53）、（1.27±1.01）分，二者差异的比较有统计学意义（P=0.008）；疾病组组织切片中导管细胞及其周围淋巴细胞均可检测到IL-21的表达，腺泡细胞未检测到阳性细胞，IL-21的表达与病理分级相关（P=0.001，r=0.628），提示IL-21的表达与淋巴细胞灶的多少有关。4疾病组与对照组TUNEL法细胞凋亡水平分别为（3.00±1.36）、（1.00±0.77）分，二者差异的比较有统计学意义（P=0.000），疾病组组织切片中腺泡细胞、导管细胞均可检测到大量凋亡细胞。5血液系统损害组、肺间质纤维化组、肾小管酸中毒组及无系统损害组SS患者CXCR5蛋白的表达评分分别为（5.00±1.41）分、（3.50±1.00）分、（5.00±1.41）分和（4.29±1.80）分，经统计学分析，四组间CXCR5表达水平差异无统计学意义，P=0.663；四组IL-21蛋白的表达评分分别为（6.00±0.00）分、（2.50±1.91）分、（6.00±4.24）分和（2.86±2.19）分，经统计学分析，四组间表达水平差异无统计学意义，P=0.311。6相关性分析显示，疾病组CXCR5与IL-21的表达水平呈显著正相关，（r=0.666，P=0.000）；疾病组IL-21表达水平与TUNEL法测得的细胞凋亡水平呈显著正相关，（r=0.599， P=0.001）；疾病组CXCR5表达水平与TUNEL法测得的细胞凋亡水平呈显著正相关，（r=0.513，P=0.007）。疾病组中IgG、IgA、IgM水平与CXCR5表达的均无相关性，分别为P=0.389、P=0.626、P=0.359；与IL-21表达也无相关性，分别为P=0.788、P=0.377、P=0.250。结论：1原发性干燥综合征组患者唇腺组织中CXCR5，IL-21的表达增高，提示：Tfh细胞与原发性干燥综合征的发病机制有关。2IL-21、CXCR5的表达与组织中细胞凋亡数呈正相关，提示IL-21、CXCR5可能促进了细胞凋亡，从而提示Tfh细胞可能与细胞凋亡的发生有关。