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刺参(Stichopus japonicus)是一种传统的滋补佳品,含有多种生物活性物质,具有抗凝血、免疫调节、降血脂、抗病毒、抗肿瘤等多种药理作用。刺参体壁蛋白含量的40%以上为胶原蛋白,但是由于它的不溶解性,关于它的相关性质报道很少。本文采用胃蛋白酶促溶的方法从刺参体壁中提取胶原蛋白,并研究了它的理化性质、对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性和体外抗氧化活性。本文的主要工作及结论如下:(1)β-巯基乙醇、0.05mol/LNaOH溶液将刺参体壁进行预处理,胃蛋白酶促溶的方法提取胶原蛋白(PSC)。对实验中各主要影响因素进行了分析,实验结果表明以胶原提取率为指标,胃蛋白酶提取的最佳条件为:pH2.0,温度为4℃,底物浓度m(刺参体壁):m(醋酸溶液)=1:10,加酶量6%,提取时间为48h。(2)系统地研究了刺参体壁胶原蛋白的理化性质。胶原蛋白为一种糖蛋白,经硫酸-苯酚法测定,其含糖量为2.7%。测定了产物的紫外图谱,符合胶原蛋白的特征。从刺参体壁提取的胶原蛋白的氨基酸组成与Ⅰ型胶原蛋白的氨基酸组成相似。在此基础上对其进行了SDS-PAGE电泳,胃蛋白酶促溶性胶原蛋白是一种异三聚体的蛋白,推测由两条α1链和一条α2链组成[(α1)2α2]。胃蛋白酶提取的刺参胶原蛋白最大程度地保持了其天然结构。热变性温度为24.3℃,刺参独特的组织特征与其热变性温度有很大的关系。刺参体壁胶原蛋白最高溶解度出现在pH2～3。当NaCl浓度大于8%以后,溶解度则随盐浓度的增大而剧烈下降。与甘油相比,刺参体壁胶原蛋白显示出更好的保水性。(3)研究了对血管紧张素转换酶(ACE)的抑制效果,实验结果表明了,刺参体壁胶原蛋白具有较高的抑制活性,IC50值为1.34mg/mL。(4)研究了刺参体壁胶原蛋白在邻苯三酚自氧化体系中对超氧阴离子的清除作用和在Fenton体系中对羟基自由基的清除作用。胶原蛋白对超氧阴离子的清除作用随着浓度的增加而增大,当浓度为3mg/mL时,对超氧阴离子的清除率可