背景和目的：膀胱癌占泌尿系恶性肿瘤中的首位，其组织病理类型中90％是膀胱移行细胞癌(Bladder Transitional Cell Carcinoma，BTCC)，其发病原因可能与多种因素有关，但确切发病机制仍未完全阐明。目前认为肿瘤的发生系癌基因活化及抑癌基因通过突变、重排或丢失等方式失活，从而丧失抑制肿瘤细胞增殖或凋亡的功能所致。基因研究在膀胱癌发生、发展机制中的作用占有重要位置，通过基因检测可使膀胱移行细胞癌的发生、发展的机制得到进一步阐明，从而为临床防治膀胱癌的方法选择提供参考依据。FHIT基因是新近发现的一个肿瘤抑制基因，它表达异常首先在肾透明细胞癌中被发现，实验表明：其在头颈部肿瘤、肺癌、乳腺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脊索瘤、骨肉瘤等肿瘤来源的细胞中也呈现异常表达，且FHIT蛋白也呈现极度降低，甚至缺如。但FHIT基因与BTCC发生、发展之间的关系尚不十分清楚，因此探讨FHIT基因在膀胱移行癌发生、发展中的作用有重要意义。 本实验通过RT-PCR方法检测FHIT基因在62例膀胱移行细胞癌和35例正常膀胱组织中表达情况，同时用免疫组织化学法检测FHIT蛋白和增殖核抗原的表达状况，进一步探讨FHIT基因在膀胱移行细胞癌发生、发展中的作用，以及FHIT蛋白与肿瘤增殖核抗原之间的关系。 材料与方法：收集2002年9月至2003年11月郑州大学一附院泌尿外科膀胱郑州大学2004年学位研究生毕业论文FHIT基因在膀脱移行细胞癌中的表达及意义癌开放手术、经尿道电切(TURBT)手术及活检标本共62例，同时获得部分病人正常膀肤组织35例。所有病人经病理证实为膀肤移行细胞癌，术前均未行放疗、化疗及免疫治疗。其中男46例，女16例，年龄29岁一78岁，平均62.5岁。每一例标本取两份，一份于10分钟内放入液氮中冻存，后移至一80℃冰箱;另一份用10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片4脚厚。肿瘤分期按UlcC一TNM标准，分为表浅性肿瘤Tis一TI组37例，浸润性肿瘤几一几组25例。病理分级按WHO方案:I级9例，n级18例，111级35例，有淋巴结转移的8例。利用Rl飞PCR方法检测上述组织FHIT基因mRNA表达情况，即FHITmRNA异常表达与FHIT蛋白和肿瘤增殖核抗原之间的关系。通过用兔抗人FHIT多克隆抗体及鼠抗人PCNA单克隆抗体，采用通用型二步免疫组化染色法，检测FHIT蛋白及PCNA抗原在62例BTCC组织及35例正常膀肤组织中的表达状况。FHIT蛋白的评判标准:按FHIT蛋白的分布阳性强度和阳性率。先按细胞染色强度评分:染色强度与背景着色相对比，无色为零分;浅黄色为1分;棕黄色为2分;棕褐色为3分。再按阳性细胞所占百分比评分:阴性为O分;阳性细胞数成10%为1分;阳性细胞数110As一50%为2分;阳性细胞数51%一75%为3分;阳性细胞数>75%为4分。染色强度与阳性细胞百分比的成积)2分为免疫反应(+)。比较同一标本癌组织和正常组织的FHIT蛋白表达状况.同时进行FHIT蛋白阳性细胞和PCNA的阳性细胞计数。PcNA以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性(染色的内皮细胞不记入)。随机计数10个高倍视野约1000个癌细胞中阳性细胞数取平均值作为PCNA增殖指数。统计分析采用SPSS10.0软件对资料进行处理，应用卡方检验和方差分析及Spe~an相关性分析，以a二0.05作为差别具有统计学意义的检验标准。结果 1.FHIT基因在正常膀肌组织中的表达水平明显高于BTCC组织，分别为91.4%(32/35)和19.4%(12/62)，二者相比有显著性差异(P<0.01)。 2.FHIT基因在BTCC组织中的表达水平(l)随着病理分级的升高，FHIT基因异常逐渐增高，且I级缺失率为33.3%(3/9);11级缺失率为77.8%(14/18);111级缺失率为94.3%(33/35);三者之间比较有显著性差异(P<0.01)。(2)TZ一T4组与Tis一Tl组相比，FHIT基因水平明显降低，两者缺失率分别为86.5%(32/37)和64%(16/25)差异有显著性(P<0.01)。(3)无淋巴结转移组BTCC与淋巴结郑州大学2004年学位研究生毕业论文FHIT基因在膀肤移行细胞癌中的表达及意义转移组相t匕，FHIT表达缺失明显降低，两者为74.1%(40/54)和87.5%(7/8)差异无显著性(P>0.05)。 3.FHIT蛋白下降在不同病理分级BTCC中的表达，I级阳性率为33.3%(3/9);11级阳性率为50%(9/18);111级阳性率93 .9%(33/35)。I级与11级相比(P<0.01)，11级与111级相比(P<0.01)，I级与111级相比(P<0.01)，均有显著性差异。 4.PCNA抗原在不同病理分级、临床分期及浸润深度表达不同:病理分级中I级增殖指数为13士5.2(%);n级增殖指数为26士10.1(%);m级增殖指数为50士10.5(%):三者相比有显著差异(P<0.05)。临床分期中，浅表Tis一Tl增殖指数为27士19(%);深度浸润TZ一T4增殖指数为42士17(%);二者相比有显著差异(P<0.05)。有淋巴结转移组增殖指数为62士10(%);无淋巴结转移组增殖指数为20士15(%);二者相比有显著差异(P<0.05)。结论 1.FHIT基因及FHIT蛋白在正常膀肤组织中的表达明显高于BTCC组织，且随着肿瘤浸润深度增加和病理分级的增高，表达逐渐减少，表明FHIT基因的减少可能与肿瘤发生、发展有关，FHIT基因的缺失可能使BTCC具有更强的侵袭能力。 2.PCNA抗原表达随肿瘤病理分级、临床分期的