研究背景阻塞性黄疸（obstractive Jaundice，OJ）患者血流动力学不稳定，易发生低血压倾向，是一个重要的临床特征。黄疸时外周血管阻力下降，血压降低，血管对内源性和外源性加压物质反应性不敏感的现象称为阻塞性黄疸血管低反应性。近年来研究提示，各类氧自由基（reactive oxygen species，ROS）大量生成，氧化应激（oxidative stress，OS）损伤加剧，是病理状态下胆汁淤积造成各器官损伤的重要原因。阻塞性黄疸时，大量生成的ROS可能通过脂质过氧化反应，损伤血管，引起血管低反应性。此外，OS损伤促进平滑肌细胞增殖、巨噬细胞粘附、血小板激活、脂质过氧化损伤增加也是高血压、糖尿病、冠心病等心血管系统疾病的病因和促发因素。阻塞性黄疸血管低反应性的预防和治疗，目前研究多致力于改善低血容量状态、心功能抑制及血管活性药物的反应性，降低肠道炎症因子产生和吸收入血诱发的内毒素血症等。值得注意的是，针对机体OJ状态时各类ROS大量生成，OS损伤加剧，进而导致血流动力学不稳定的机制研究尚不深入，给予不同类型和不同药理机制的抗氧化剂治疗能否改善血管低反应状态的报道，目前暂无公认。机体氧化还原状态与心血管活动密切相关，谷胱甘肽（glutathione，GSH）是细胞内含巯基最为丰富的一类化合物，是机体最重要的抗氧化小分子物质，GSH相关的谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）和谷胱甘肽-S-转硫酶（glutathione-S-transferases，GST）也是机体维持氧化还原平衡的重要抗氧化剂。因此，我们设想，是否能够通过补充临床常用药物还原型GSH作为外源性抗氧化剂，以提升机体总抗氧化能力，由此对抗OJ时大量生成ROS及其诱发的OS，进而可能对血管收缩和舒张功能有一定改善作用。研究方法1．建立胆总管结扎（bile duct ligation，BDL）大鼠灌胃给药模型：Sprague-Dawley（SD）大鼠还原型GSH灌胃300mg/kg/d预处理7d，第八天时，一半大鼠行胆总管结扎术，之后，将大鼠按是否接受GSH预处理，分为SHAM组、BDL模型组、SHAM+GSH组和BDL+GSH组，继续灌胃至术后第七天，4组大鼠血清测定肝功能，分光光度法检测血清还原型谷胱甘肽（GSH）水平。2．酶联免疫吸附剂测定法（enzyme linked immunosorbent assay，Elisa）检测4组大鼠血清肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）和OS蛋白质损伤标志物3-硝基酪氨酸（3-Nitrotyrosine，3-NT）。比色法分别检测4组大鼠血清脂质过氧化损伤标志物丙二醛（malondialdehyde，MDA）、机体抗氧化酶GPx、过氧化氢酶（catalase，CAT）和血管活性相关的一氧化氮（nitric oxide，NO）和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）。3．离体血管张力实验，测定4组大鼠离体胸主动脉环对不同浓度梯度去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）的收缩反应以及对乙酰胆碱（acetylcholine，Ach）和硝普钠（sodium nitroprusside，SNP）的舒张反应的变化。用一氧化氮合酶抑制剂预处理和机械去除胸主动脉环内皮的方法，测定NO和血管内皮细胞层对血管环舒缩反应的影响。结果1、BDL大鼠补充外源性抗氧化剂GSH后，肝功能改善，谷胺酰转氨酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）和血清总胆红素水平降低。2、BDL大鼠补充外源性抗氧化剂GSH后，提高机体巯基（SH）储备和抗氧化酶CAT和GPx水平，降低炎症因子TNF-α、IL-1β表达，缓解iNOS诱导的NO过量合成，对抗ROS和OS的氧化损伤，表现为MDA和3-NT降低。3、在大鼠离体胸主动脉环张力实验中，GSH显著增强血管内皮完整动脉环对NE的收缩反应，去除内皮或者给予非选择性一氧化氮合酶抑制剂后，GSH的保护作用消失。此外，GSH显著增强Ach诱导的内皮依赖性血管舒张，而对SNP诱导的非内皮依赖性血管舒张无影响。结论本研究从整体动物水平，研究还原型GSH对胆汁淤积下血管低反应性的影响。实验结果表明，补充外源性GSH显著增强BDL大鼠机体抗氧化能力，改善了离体血管的收缩和舒张反应，其机制与GSH减轻整体氧化应激损伤，减少过氧化氢（hydrogenperoxide，H2O2）和超氧阴离子（superoxide anion，O2.-）生成，抑制NO转化为亚硝基阴离子（peroxynitrite，ONOO.），改善NO生物利用度，保护血管内皮功能有关。