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不同细胞对不同尺寸的丝素蛋白颗粒表现出不同的粘附或内吞行为。用丝素颗粒作为药物控制释放载体时,细胞是否对其粘附或内吞,将直接影响其装载的药物的传递效率和对细胞的作用位点。为了探讨不同细胞对不同尺寸的丝素颗粒表现出的相应的细胞行为,本文用高压静电喷射技术等方法制备四种不同粒径的丝素蛋白颗粒,分别与人脐静脉血管内皮细胞EA.hy 926和人宫颈癌细胞HeLa共培养,研究四种丝素颗粒与两种细胞的相互作用规律,为向正常组织细胞或肿瘤细胞输送药物时选择相应的丝素载体尺寸提供初步依据。首先,采用高压静电喷射等方法制备出四种不同粒径的微/纳米颗粒,并采用异硫氰酸荧光素(FITC)和量子点(QD)两种物质,标记丝素微/纳米颗粒,获得丝素蛋白荧光微/纳米颗粒。用扫描电镜(SEM)观察丝素微/纳米颗粒的表面形貌,同时用激光共聚焦、透射电镜、傅立叶变换红外吸收光谱、能谱、荧光光谱仪等手段对荧光微/纳米颗粒进行鉴定。结果表明,所制得的四种微/纳米颗粒的平均粒径分别为232.1μm、105.1μm、1.9μm、51.1 nm,且四种微/纳米颗粒形状呈球形或椭球形,表面有小颗粒状物质、形貌粗糙;两种荧光标记物均能标记到丝素蛋白微/纳米颗粒表面,且量子点标记的微/纳米颗粒具有较高的荧光稳定性。其次,研究了粒径为1.9μm(SFMP3)和51.1 nm(SFNP)的丝素蛋白颗粒与细胞的相互作用。采用荧光示踪的方法动态跟踪EA.hy 926细胞和He La细胞对SFMP3和SFNP的粘附及摄取,并用CCK-8法检测不同浓度的丝素颗粒及两种不同方式标记后丝素颗粒的细胞增殖。结果表明,微米级丝素颗粒(SFMP3)对细胞增殖有促进作用,在HeLa细胞培养基中丝素微米颗粒浓度大于0.5 mg/ml时,这一作用比EA.hy 926细胞显著;而纳米级丝素颗粒(SFNP)对细胞的增殖有抑制作用,对EA.hy 926细胞的抑制作用比对HeLa细胞的抑制作用显著。对与EA.hy 926细胞和HeLa细胞共培养的丝素颗粒进行跟踪观察的结果表明,微米级颗粒与细胞培养后能与细胞贴附,但不会被细胞摄取;而纳米级颗粒则在与细胞共培养后会被细胞摄入,随着时间的延长摄入量越多,HeLa细胞对丝素纳米颗粒的摄入能力明显比EA.hy 926细胞强。最后,研究了细胞在丝素微球(SFMP1和SFMP2)表面的粘附及生长。扫描电镜(SEM)观察结果表明,HeLa细胞和EA.hy 926细胞在与丝素微球共培养8-12 h后,培养板表面粘附的细胞开始迁移并粘附在微球表面,随着培养时间的延长,粘附在微球表面的细胞开始铺展、增殖,He La细胞的增殖速度快于EA.hy 926细胞。粒径较小的丝素微球SFMP2比粒径较大的丝素微球SFMP1更有利于细胞的粘附。本文用高压静电喷射等方法制备的丝素蛋白微/纳米颗粒,以及观察到的细胞对不同尺寸的丝素颗粒表现出的相应内吞或粘附现象,为向细胞输送药物时选择相应的丝素载体尺寸提供了初步的实验依据。