丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)细胞信号转导通路是细胞内重要的信号转导系统，介导细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程，还参与细胞恶性转化等病理过程。已发现真核细胞存在细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶/应激激活蛋白激酶(JNK/SAPK)、p38/再活化激酶(p38/RK)和大丝裂原活化蛋白激酶(BMK1/ERK5)四条MAPK通路。 ERK和p38是分布于细胞浆内具有丝氨酸和酪氨酸双重磷酸化能力的蛋白激酶，是MAPK细胞信号转导通路中重要的成员。已证实，p38在鳞癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中高度激活，ERK在胰腺癌等病中高度激活。当HSV、HIV、EBV等病毒感染时，p38明显激活。 尖锐湿疣(CA)是由人类乳头瘤病毒(HPV)感染引起的性传播疾病(STD)。常见的是HPV6型或11型感染。HPV6、11型致癌性较小，形 2003年浙江大学医学院硕士论文成的是局部鳞状上皮过度增生，如 CA、寻常疣等，而 HPV、侣型感染易引起细胞恶性转化，与宫颈癌等生殖器癌的发生密切相关。己有研究表明，HPV型感染时，MAPK活性增加；HPV EIE4蛋白通过PKA和MAPK途径磷酸化；HPV16ES基因产物能通过表皮生长因子受体（EGFR）依赖途径激活ERK和促细胞增殖，还能通过非EGFR途径激活ERKI／二和p3 SMAPK。国内外有关 CA的细胞信号转导通路的研究尚少，深入探讨 CA的细胞信号转导机理，对寻找有效阻断信号转导途径的位点，开发特异性蛋白激酶抑制剂，有望对CA的防治提供新的治疗前景。 为了研究尖锐湿疣皮损角质形成细胞中活化型激酶 ERK（磷酸化E叫，pERK）和活化型激酶p38（磷酸化p38，pp38）的表达，本课题采用免疫组化 En Vision二步法检测 50例 CA皮损及 25例健康男性正常包皮组织中 pERK和 pq38的表达情况。通过分析pERK和 pp3s的表达，以进一步了解pERK和pp38在CA细胞信号转导通路中的意义。 材料与方法 收集CA标本50例，经原位杂交方法确定HPV 6／11阳性，即为HPV6／11相关 CA。采用免疫组化法（En Vsion二步法）检测 CA皮损中和 25例正常人皮肤（包皮）组织中 pERK和 p下3 8的表达及分布。所用的一抗分别为：活化型ERK单抗和活化型p38单抗。实验结果判断：在上皮层细胞核有明确棕黄色为阳性细胞。按阳性细胞所占百分比，用四级半定量法评估 阳性反映强度。统计处理采用等级分组资料的Ridit检验。对CA组PERK 和 pp3 8的表达进行计数资料相关性分析。 3 2003年浙江大学医学院硕士论文 结 果 1．原位杂交结果： CA组皮损内大量棘细胞中上层及颗粒层细胞的核显示蓝紫色颗 粒，即为 HPV 6／l感染阳性。正常对照组 25例上皮组织未见阳性信 号，示HPV阴性。 2．pE队和 pp3 8表达的免疫组化染色结果： 50例＊A患者皮损，p＊RK的表达较正常皮肤明显增高，统计学 上有显著性差异（u＝4．113，P＜0刀1）。阳性细胞主要分布于棘细胞层， 尤以空泡细胞为著。阳性信号定位于胞核，为棕黄色着色。 扣例CA患者皮损，pp38的表达较正常皮肤有明显增高，统计 学上有显著性差异…一．497，p叩刀1卜 阳性细胞主要分布于棘细胞层， 尤以空泡细胞为著。阳性信号也定位于胞核，为棕黄色着色。 3．CA中 PERK和 pp3 8表达的相关性分析： 对50例CA中pERK和pp38的表达进行相关性分析，，0．42， P功刀1，从而得出结论，pERK与pp38的表达呈显著相关性。 讨论与结论 卜本研究结果显示，HPV6门 阳性的CA中，pE皿和p？38的表达较正常皮肤明显增高，提示在 HPV6／l感染时，角质形成细胞内 ERK和P38的激活增加。在 HPV6＊ 感染的 MAPK细胞信号通路中，至少通过ERK和 p38二条通路起作用。由此推测 HPV的某些基因或蛋白可通过影响MA K通路的这二个环节，从而改变宿主细胞的生物学特性，如细胞增殖或转录等的改变。 4 2003年浙江大学医学院硕士论文 2、HPV6n 感染CA皮损中，pE肌与p巾38的表达呈显著相关性，（r＝0．42，P＜0刀1＞提示HPV6／11感染时，E皿和 p38二条MAPK通路同时受到协同激活，并可能均参与HPV感染细胞的转录表达改变和增殖活性改变，进而参与致病机制。