目的 乙型肝炎病毒(HBV)宿主范围窄，动物模型缺乏，体外组织培养也一直没有多大进展，且不能在体外人工培养，制约了对HBV的研究进展。将HBV DNA转移至靶细胞，建立表达HBV的体外培养细胞模型，对研究HBV生物学特性和肝炎发病机制有重要意义。本研究采用基因转染技术，建立肝癌细胞(HepG2)HBV复制模型，使其分泌HBV，为后续HBV体外感染研究提供病毒样颗粒。我室多年从事HBV宫内感染研究，并提出了HBV感染胎盘的“细胞转移”假说，但具体的细胞机制尚不确切，因此本研究在建立HBV的HepG2细胞模型基础上，以绒毛滋养细胞(HPT-9)为靶细胞建立HBV的细胞模型，为HBV感染胎盘的机制研究提供新的手段。 方法 1．pcDNA3／3HBV重组质粒的构建：获得HBV全基因亚克隆载体pUC19／3HBV和真核细胞表达载体pcDNA3，酶切及测序鉴定。胶回收3倍HBV基因和线性pcDNA3，然后在T4 DNA连接酶作用下4℃连接。连接产物(pcDNA3／3HBV)酶切鉴定。