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本文旨在研究葛根素是否抑制体外培养的人视网膜色素上皮细胞增殖;研究葛根素是否抑制糖基化终产物和氯化钴诱导人RPE细胞分泌低氧诱导因子-1α。3、探讨HIF-1α在糖尿病视网膜病变中的作用,从而探索针对HIF-1α的药物治疗DR的可能性。
本实验采用已经成熟的酶消化法分离人RPE细胞,进行形态学观察并用免疫组织化学法做抗人角蛋白抗体鉴定,取3-8代细胞用于实验;细胞计数法检测不同浓度葛根素和0.1mg/ml葛根素在不同时间对人RPE细胞增殖活性的影响,并计算出相应的细胞增殖抑制率;四唑盐比色法检测不同浓度葛根素作用24h对人RPE细胞增殖活性的影响;用3H-TdR掺入法检测不同浓度葛根素作用24h对人RPE细胞DNA合成的影响;免疫组织化学法检测葛根素对AGEs和CoCl2诱导人RPE细胞HIF-1α表达的影响,结果表明,葛根素可显著抑制人RPE细胞增殖及DNA合成,抑制AGEs和CoCl2刺激RPE细胞HIF-1α的表达,提示抑制HIF-1α的表达可能是治疗DR的新策略,葛根素有望进一步用于DR药物治疗的研究。