目的:动脉粥样硬化的起始和进展主要由炎症细胞的募集和细胞因子的分泌所驱动的。本次研究目的是探讨化合物油酰乙醇胺(oleoylethanolamide,OEA)是否抑制树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟,抑制动脉内膜增生从而减轻动脉粥样硬化。已发现OEA是一种生物活性脂质,能减少脑缺血再灌注后脑梗死、大脑皮层凋亡程度和缓解血管内膜增生。然而,OEA是否部分通过调节DC免疫成熟抑制内膜增生仍有待鉴定。方法:在本研究中,我们使用体外和体内实验来证明OEA对DC成熟的影响。体外实验,使用6-8周龄雄性C57BL/6小鼠,取得骨髓来源的DC用6孔板培养,组别依次为对照组(Control)、实验组(LPS 200ng/ml)、给药组(OEA 20、40、80u M),培养7天后通过使用流式细胞术分析检查DC表面成熟标志物CD80、CD86、MHCII,通过细胞迁移实验测试DC迁移能力,在共培养DC与T细胞系统中测定T细胞增殖,以及通过使用PCR测量细胞因子IL-6、IL-12、TGF-β产生。为了阐明OEA是否影响TLR4/NF-κB通路,我们使用蛋白质印迹确定了TLR4的蛋白质水平和蛋白p65的磷酸化水平。同时探讨了OEA对DC成熟的抑制作用是否通过其受体瞬时受体电位香草酸-1(transient receptor potential vanilloid-1,TRPV-1)及潜在机制。实验中加入TRPV1的拮抗剂CPZ,此外,为探讨蛋白激酶AMPK在OEA诱导的通过TRPV1激活抑制TLR4/NF-κB信号通路中的作用,加入AMPK拮抗剂化合物C(Compound C,CC)。体内实验,取6-8周的雄性C57BL/6小鼠,每组10只,OEA组剂量为10mg/kg,20mg/kg和OEA40mg/kg预保护3天,腹腔注射LPS 2.5ug诱导脾DC的成熟。球囊损伤模型实验用约250-280g的雄性SD大鼠,每组10只,分假手术组、BI组、OEA组,用2F球囊导管将左颈总动脉(CCA)损伤3次。在球囊损伤前和伤后4天给予OEA干预。结果:从体外各实验中观察到OEA有抑制DC成熟的作用。OEA处理后DC内Ca2+浓度增加,相应地在LPS诱导的小鼠脾脏DC成熟中,OEA对用CPZ处理的小鼠脾脏MHCII作用被消除。TLR4/NF-κB途径是LPS诱导DC成熟的经典途径。结果显示LPS刺激增加,并且OEA治疗显著下降TLR4和p-p65的蛋白水平。同时CPZ组显著阻碍了OEA对TLR4/NF-κB的减少作用。结果表明阻断AMPK对OEA处理组减少TLR4没有影响,但有效地逆转了OEA抑制NF-κB水平。说明OEA下调TLR4/NF-κB,是通过激活TRPV1和激活AMPK。综上这些结果表明OEA通过激活TRPV1和AMPK抑制DC成熟,这可能有助于其减轻球囊损伤诱导的内膜增生。相应地在LPS诱导的DC成熟小鼠模型中,OEA降低了脾DC上的成熟标志物,与OEA减少了大鼠球囊损伤诱导的早期新内膜中DC的积累,两个动物模型说明OEA对DC成熟的抑制作用相一致,这有助于通过OEA缓解新内膜增生。这些发现增加了我们对这种内源性脂质OEA的理解。结论:(1)OEA能够抑制DC成熟从而减轻免疫炎症反应;(2)OEA能够抑制DC数量,减轻球囊损伤所致的动脉内膜增生,具有显著的血管保护作用;(3)OEA可能是通过激活TRPV-1受体调控TLR4/NF-κB信号通路,从而抑制DC成熟。