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海南是华南地区对虾的主产区，海水养殖对虾是海南水产养殖的支柱产业，其产量约占海水养殖总量的60％。对虾病毒病是一剧烈的传染病，一旦发生、流行，会给对虾养殖业带来毁灭性的打击。因此长期以来，对虾病毒病毒的防治，一直是严重威胁和影响水产养殖业发展的重大难题，也是科学家高度关注的热点之一。迄今为止，对虾病毒病的防治重点仍立足于预防，关键的方法之一是选用优质的种苗(SPF种苗)。繁育SPF对虾种苗，必须在分析、鉴定对虾病毒病的病原病毒种类的基础上，建立高灵敏度、高特异度的病原病毒检测技术，采用该技术对繁育过程中的SPF对虾种苗进行严格监控，才能有效的保证所繁育的SPF对虾种苗的质量。海南地区海水养殖对虾的主要品种为南美白对虾，导致对虾病毒病发生的原因可能是由一种病毒感染，也常常由多种病毒的混合侵染，而引发海南地区海水养殖对虾病毒病发生的对虾病毒的种类，迄今还未有报道。
本课题研究的目标定位为：分析、鉴定海南地区海水养殖对虾主要品种(南美白对虾)病毒病的病原病毒种类，并在此基础上，建立高灵敏度、高特异度的检测方法，为海南地区海水养殖对虾病毒病的防治提供基础数据和技术支撑。研究结果简述如下：
1、WSSV和IHHNV是侵染海南地区海水养殖对虾最主要的两种病毒，且常存在混合感染。经对海口、三亚、儋州、琼海、万宁、东方、文昌等市县南美白对虾养殖场及市售对虾的采集取样，采用OIE推荐的病毒检测方法，对我国报道的WSSV、TSV、IHHNV三种对虾主要病毒进行病毒种类分析鉴定，结果发现，所采集的对虾样品中：67.6％携带WSSV，45.9％的携带IHHNV；同时携带此两种病毒的占32.4％，而携带TSV仅占5.4％。
2、建立了高灵敏度、高特异性的多重巢氏PCR检测WSSV与IHHNV对虾病毒技术。PCR检测方法和核酸杂交、ELISA等其他分子检测方法相比，具有方便、快捷、灵敏度高等优点。目前各种对虾病毒病均有PCR检测方法的报道，但普通的PCR设计策略是用一对引物扩增一个靶序列，仅用于一种病毒的检测，而且常存在假阳性的问题。本研究中建立的WSSV与IHHNV多重巢氏PCR检测体系，根据两种病毒的DNA序列，设计了四对特异引物，外引物在一个PCR反应中同时扩增到大小分别为988bp和860bp的病毒特异片段，内引物在一个PCR反应中同时扩增到大小分别为461bp和344bp的病毒特异片段，而对健康对虾组织DNA及其他对虾病毒DNA无任何条带出现。多重巢氏PCR条件优化后可从1fg/μl的WSSV与IHHNVDNA模板中定性检测出此两种病毒，比外引物多重PCR敏感度要高3个数量级，比内引物多重PCR敏感度要高2个数量级。为了进一步说明多重巢氏PCR的敏感性问题，本研究还制备了WSSV与IHHNV地高锌标记的特异探针，对外引物多重PCR产物进行了PCR斑点杂交，同时进行单纯的WSSV与IHHNVDNA斑点杂交，结果表明：多重巢氏PCR检测WSSV与IHHNV的特异性可靠，灵敏度与多重PCR斑点杂交相当，比直接核酸杂交要高6个数量级。本研究还随机抽取的20个样品，用本研究所建立的WSSV、IHHNV多重Nest-PCR检测体系进行检测，所得的结果与采用OIE所推荐WSSV、IHHNV检测方法得出的结果一致，说明本研究所建立的检测体系准确性可靠。