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目的:筛选合适放射剂量建立放射性肺损伤(RILI)模型,通过观察丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞对RILI大鼠体重、外观、Smad3、P-Smads3、Smad7及TGF-β1蛋白表达水平、血清细胞因子以及肺组织病理的影响,初步探讨丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞对大鼠RILI的疗效。方法:(1)实验第一部分:分别使用15、18、20Gy不同剂量的60 Coγ射线照射同组别大鼠双侧胸部,筛选合适放射剂量建立大鼠RILI模型。(2)实验第二部分:将SPF级成年雌性SD大鼠60只,除12只假手术组外,其它4组均予全胸部18Gy一次性照射建模;造模后予假手术组(A组12只,腹腔和尾静脉注射生理盐水)、模型对照组(B组12只,腹腔和尾静脉注射生理盐水)、丹参酮IIA组(C组12只,腹腔注射丹参酮IIA注射液,尾静脉注射生理盐水)、HUMSCs组(D组12只,腹腔注射生理盐水,尾静脉注射HUMSCs)、丹参酮IIA+HUMSCs组(E组12只,腹腔注射丹参酮IIA注射液且尾静脉注射HUMSCs),且各组腹腔注射均为造模后连续30天注射15ml/kg/d,尾静脉注射为造模后单次注射1ml。分别于第30天及60天两个时间点随机抽取各组6只大鼠处死,检测大鼠体重、外观评分;使用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中转化生长因子β1(TGF-β1)、促炎症细胞因子白介素6(IL-6)的表达;对肺组织进行HE及Masson染色;蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测大鼠肺组织Smad3、P-Smads3、Smad7及TGF-β1蛋白表达水平。对相关实验指标进行统计分析,初步探讨丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞对大鼠RILI的疗效。结果:(1)筛选并确定18Gy为合适放射剂量,建立大鼠放射性肺损伤模型。(2)各组大鼠体重评价的比较:实验前各组大鼠体重无统计学差异(P>0.05)。与假手术组比较,第30天、第60天,模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组体重均显著低于假手术组组(P<0.05)。与模型组比较,第30天、第60天,假手术组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组体重显著高于模型组(P<0.05)。丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组间体重在第30天差异无统计学意义(P>0.05)。在第60天,丹参酮IIA联合HUMSCs组体重显著高于丹参酮IIA组和HUMSCs组(P<0.05),丹参酮IIA组和HUMSCs组两组体重在第60天差异无统计学意义(P>0.05)。(3)各组大鼠外观评分的比较:第30天时假手术组大鼠评分显著高于模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组和丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异具有统计学意义(P<0.05)。而模型组评分显著低于假手术组、丹参酮IIA组、HUMSCs组和丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异具有统计学意义(P<0.05)。丹参酮IIA组、HUMSCs组和丹参酮IIA联合HUMSCs组三组间评分未见统计学差异(P>0.05)。第60天时各组评分差异显著,评分由高到低分别为假手术组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、模型组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(4)各组大鼠肺组织病理评价的比较:第30天时,各组肺组织炎症评分由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组,其中丹参酮IIA组、HUMSCs组两组间无统计学差异(P>0.05),其余各组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。第60天时,模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组三组的炎症评分显著高于丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异具有统计学意义(P<0.05),模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组三组间无显著统计学差异(P>0.05)。肺组织纤维化方面,第30天和第60天时,纤维化评分由高到低均为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(5)各组大鼠血清TGF-β1和IL-6水平的比较:本实验第30天,各组大鼠TGF-β1和IL-6水平由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、假手术组,实验第60天,各组大鼠TGF-β1水平由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、假手术组,但各组IL-6水平差异无统计学意义。(6)各组大鼠肺组织中Smad3、P-Smad3、Smad7、TGF-β1蛋白表达水平的比较:实验第30天和第60天,各组大鼠TGF-β1、Smad3、P-Smad3蛋白表达水平由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、假手术组。而Smad7表达水平由高到低分别为假手术组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、HUMSCs组、丹参酮IIA组、模型组。结论:(1)在一定条件下对大鼠进行18Gy的照射剂量放疗可建立大鼠放射性肺损伤模型。(2)丹参酮IIA、HUMSCs及两者联合使用均可减轻肺泡炎症反应,延缓肺纤维化进程,对肺组织起到保护作用。(3)丹参酮和HUMSCs其对放射暴露后肺组织的保护机制可能是通过多个途径实现:(1)下调TGF-β1蛋白表达,下调Smad3及p-Smad3蛋白表达,上调Smad7蛋白表达。(2)抑制血清中促炎性因子IL-6和促纤维化因子TGF-β1的释放。(4)两者联合使用可进一步下调TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白表达,上调Smad7蛋白表达。