犬肝损伤模型的建立及超声影像在肝损伤中的评价研究

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肝损伤是指由于各种因素导致肝细胞受损、破坏肝脏的生理结构、影响肝脏功能的动态病理过程。饮食不当、微生物感染、药物使用不当均会引起肝损伤。随着病理变化过程的加重,肝损伤可形成肝炎、肝纤维化、肝硬化甚至肝癌,进而导致较严重的临床结局。在兽医临床上,可以通过血液学检查、影像学检查、肝脏活组织检查等方法诊断肝损伤。肝细胞通透性改变会导致血液生化指标的急剧上升,但有时不能准确反应是否发生肝损伤,易与其他组织损伤引起的血液学变化相混淆。影像学检查可以直接观察肝脏形态及血流动力学的变化,实时反应肝脏状态。因此,影像学检查是临床上诊断肝脏疾病的重要检查方法。四氯化碳(CCL4)是一种对肝脏具有强损伤作用的亲肝性化学物质,通过其代谢产生的自由基所致肝损伤。酒精一般指乙醇,可以通过代谢产物诱导肝脏氧化应激引发肝损伤。本试验参考大量关于化学物质引发肝损伤的文献,应用四氯化碳联合酒精诱导法建立犬肝损伤模型,在建模过程中连续观察试验犬血液生化、DR、肝脏的二维超声影像、彩色多普勒超声参数的变化,评估超声诊断技术对犬早期肝损伤的诊断意义。此次试验选取6只1-2岁体重10 kg左右的本地犬作为试验犬,在建模前所有试验犬进行血常规、血液生化检测及传染病筛查,各项结果均在正常范围内,DR及肝脏超声检查均未见异常,饲养一周后进行试验。以0.15 ml/kg的剂量腹腔注射四氯化碳油溶液联合饮用10%酒精溶液的方法建立犬肝损伤模型。试验过程中进行4次相同部位的DR检查,比较建模前后变化。建模开始后每3d进行一次超声影像学检查,同时通过头静脉采血进行血液生化检查。试验结束后,取试验犬肝脏组织用于病理学观察。结果:DR检查显示建模前后肝脏体积变化不显著。血液生化分析发现肝脏主要指标均有显著性变化。与建模前相比,ALT、AST、ALP在给药第3d起活性显著升高且超过正常范围(P<0.05),TBIL、GGT在整个实验过程中一直缓慢升高,TBIL给药第24d起,与建模前相比差异显著(P<0.05),GGT给药第4d起与建模前相比显著升高(P<0.05)。ALB持续缓慢下降,给药第27d时与建模前相比显著下降(P<0.05)。给药0-33d时肝实质回声逐渐增粗,胆囊壁逐渐增厚,给药第39d时,B超影像显示肝实质呈质地粗糙的高回声,胆囊壁明显增厚,囊内出现中等回声结构。彩色多普勒超声显示门静脉内径变宽,血流速度逐渐降低,第15d时所测的门静脉内径、血流速度与建模前比较有显著性差异(P<0.05)。病理切片显示肝细胞肿胀、变性,部分肝细胞坏死,细胞核不清晰,细胞内可见胆色素沉积。通过结果分析,证明了腹腔注射0.15 ml/kg四氯化碳油溶液和口服酒精溶液联合作用的可行性,成功建立了犬肝损伤模型,收集了肝损伤不同阶段的血液生化及超声影像变化过程,为犬肝脏疾病在兽医临床诊断上提供了科学依据和实验数据,为宠物临床的肝胆疾病诊断提供参考。
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