鹅红细胞的抗菌活性研究

来源 :仲恺农业工程学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jxncjwt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
家禽养殖行业在我国畜牧业中具有重要地位。其中,鹅作为中国的最大禽类养殖种类之一,在中国农业经济中有着重要的地位。近年来,随着人类对优质蛋白需求的增加,牲畜的养殖规模和密度也迅速增加,因此开展禽类的基础免疫研究和高效的疾病防控具有重要意义。红细胞占血细胞总数的95%以上,其主要功能是在机体内运输氧气。近年来的研究表明,哺乳动物和鱼类红细胞也参与了机体的免疫调节功能。然而,对于禽类红细胞免疫机制还尚未清楚。因此,本研究以马冈鹅为研究对象,对其红细胞在抗菌机理方面进行研究,主要结果如下:1、为了探究鹅红细胞对乳胶微球和细菌的吞噬活性。将鹅红细胞分别与直径大小不同的乳胶微球和FITC标记后的三种细菌(金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌)共孵育,利用荧光显微镜观察发现,鹅红细胞对直径0.1-2.0μm乳胶微珠有吞噬或粘附作用。通过扫描电镜结果显示,0.8μm乳胶微球在单个红细胞表面,形成内陷,部分被吞噬。为了进一步证实鹅红细胞的吞噬作用,在透射电镜下观察到,红细胞内也可见到乳胶微珠。利用流式细胞仪对直径大小不同的乳胶微球和三种细菌进行吞噬活性的检测,结果显示,鹅红细胞对直径0.1-1.0μm乳胶微珠和不同的细菌表现出了广泛的吞噬或粘附活性。2、为了探究鹅红细胞的抗菌机理,我们将鹅红细胞与三种细菌(金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌)共孵育1 h、2 h和4 h,通过荧光探针标记活性氧(Reactive oxygen species,ROS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)。利用流式细胞仪进行检测分析,检测结果表明鹅红细胞具有在细菌刺激下促进了ROS和i NOS的产生。此外,检测了三种细菌共孵育后红细胞中抗氧化酶活性,检测结果表明,三种细菌应激后,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)活性均呈现上调的趋势。为进一步研究红细胞的抗菌机制,我们进行了平板稀释实验,菌落计数结果显示,红细胞在2-4h对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌显示出很强的抗菌活性。3、为了探究鹅红细胞在细菌刺激下的免疫应答。本研究通过三种细菌分别与鹅红细胞进行共孵育1 h、2 h、4 h和8 h,利用荧光定量PCR检测了炎症因子的表达情况。结果发现Toll-like receptor-(TLR-)4、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)在2h和4h的表达呈现显著上调的趋势。此外,为进一步探究ROS来源,我们发现红细胞内的NADPH酶的两个亚基NOX1和NOX5表达显著上调,揭示了NADPH酶参与鹅红细胞ROS的免疫调控作用。4、为深入探究鹅红细胞的抗菌相关免疫调控机制,对大肠杆菌和LPS刺激鹅红细胞进行了转录组测序。共注释到的基因数为12,795,其中已知的基因为12,597个,预测的新基因为198个。通过85个差异表达基因(DEGs),其中35个基因表达量上调,50个基因表达量下调。其中,KEGG分析结果显示,在大肠杆菌刺激鹅红细胞后差异基因主要富集在红细胞的Th1、Th2和Th17细胞分化、抗原处理和呈递和N-糖聚糖生物合成和JAK-STAT信号通路上;另一方面,通过从转录组的时间序列中选取了与细胞内吞作用相关的基因,均为三个上调基因(MHC1、ARRB和TRAPPC2)的DEGs进行q RT-PCR实验以验证RNA-seq数据的准确性。结果表明所选基因表达趋势符合转录组的时间序列的测序数据一致,表明测序数据准确可靠。
其他文献
杜鹃花属(Rhododendron L.)是杜鹃花科中最大的属,全世界约有1000种,广泛分布于亚洲、北美洲和欧洲。根据现有的文献资料统计,广东省有杜鹃花属植物39种,3变种,海南省有7种,1变种。由于本属种类较多,形态性状变异式样复杂,很多种类的分类地位和物种划分存在争议,尤其是岭南杜鹃R.mariae、马银花R.ovatum及其近缘的种类。为了解决这些种类的分类学问题,本研究通过查阅文献、标本
学位
鹌鹑是研究禽类季节性繁殖调控机理的极佳模型,其繁殖活动受到光周期的严格调控。光周期通过影响下丘脑神经递质和血清类固醇激素的代谢进而影响禽(鸟)类的繁殖活动。然而,类固醇激素和神经递质在不同光周期下的关系尚不十分清楚。本试验通过测定不同的光周期条件下的鹌鹑下丘脑组织中27种神经递质和血清中的42种类固醇激素的代谢变化,以期揭示神经递质与类固醇激素的变化规律及其相关性,为完善禽类的繁殖调控理论提供科学
学位
非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)是全球重要的商品花卉之一,其在国际切花市场的销售额名列第5。该切花不带叶片,但采后仍易于发生失水萎蔫和品质损失。前人观察到非洲菊切花的花瓣、花萼和花茎等非叶部位都有气孔分布,且以花萼的气孔密度最大,但迄今对花萼气孔失水的发生与内在机理尚缺乏研究和认识。为此,本论文首先观测和比较了非洲菊切花‘金太阳’(‘Gold Sun’)品种各部位的水分散失
学位
月季(Rosa hybrida)切花采后易发生叶片和花瓣的水分散失,并因之造成花枝凋萎和观赏品质受损。迄今关于月季切花气孔形态特征与采后调控研究尚鲜见报道。为此,本论文首先比较了几种气孔观察方法对月季叶片气孔的观察效果,接着观察和分析不同品种月季切花的气孔分布和形态特征以及月季切花瓶插寿命和采后失水与部分气孔参数的相关性,然后着重探究不同光强和不同浓度纳米银处理对月季切花‘卡罗拉’花枝及离体叶片水
学位
枫香(Liquidambar formosana Hance)是我国重要的药用和香精香料植物资源,其叶片富含萜类化合物,具有抗炎、抑菌、抗肿瘤等功效,属有开发前景的抗生素替代品。迄今为止,不同种源枫香叶片挥发物组成分析、季节性累积规律及其生物合成机制的研究鲜有报道,限制了枫香资源利用。针对上述问题,本研究以河源市东江林场收集保存的广东9个不同种源枫香为研究对象,采用固相微萃取和气相色谱-质谱(HS
学位
猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)感染引起的急性传染病,且新出现的PRV变异株呈现毒力增强趋势,给我国养猪业造成了严重的经济损失。在PRV感染猪只的过程中,首先在鼻咽黏膜和上呼吸道黏膜上皮细胞进行复制,因此对猪只进行滴鼻免疫能加强黏膜免疫应答,是防御PRV病原入侵机体的最佳手段。有研究表明,细菌鞭毛蛋白FliC能诱导机体黏膜局部产生对抗病原感染最主要效应的因
学位
蒭雷草(Thuarea involuta(Forst.)R.Br.ex Roem.et Schult.)、细穗草(Lepturus repens(G.Forst.)R.Br)、沟叶结缕草(Zoysia matrella(L.)Merr.)、狗牙根(Cynodon dactylon(L.)Pers.)以及地毯草(Axonopus compressus(Sw.)Beauv.)是海岛常见的草坪草,是海岛
学位
本试验以京粉1号蛋鸡为研究对象,在玉米-豆粕型日粮中补充不同水平二氢杨梅素锌(Zinc Dihydromyricetin,DMY-Zn),研究其对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化指标、肝脏形态、肠道健康、脂代谢和微量元素沉积的影响;同时对比与其他锌源间的效果差异,为DMY-Zn在蛋鸡生产上的应用提供科学依据。试验选取362日龄京粉1号蛋鸡504只,随机分为7组,每组6个重复,每重复12只鸡。即为基础
学位
我国是养鹅大国,育雏期的雏鹅没有一个统一的饲养标准。使用传统的饲喂方式,随意配料,导致雏鹅腹泻脱水、生长缓慢、疫病频发、死亡率增高,养鹅的经济效益下降,严重影响我国养鹅业的发展。本研究通过对实际生产中育雏期不同饲喂方案对雏鹅生长性能、肠道健康和尿酸代谢影响的比较,有望探究出一种雏鹅育雏期间的饲喂方案,为雏鹅育雏提供一个参考标准。并希望通过对饲喂方案中添加青饲料和益生菌对雏鹅肠道健康的改善效果和尿酸
学位
我国是世界上最大的水禽生产国,鸭饲养量占到我国水禽饲养总量的70%以上。蛋鸭养殖是我国重要的产业,每年生产300万吨以上的鸭蛋,为社会提供了诸如咸蛋、咸蛋黄、蛋黄粉、蛋黄油、皮蛋等大量农副产品。日益增长的需求促使现代化养殖模式的推进,当前蛋鸭笼养已然成为趋势。家禽对温度敏感,日益加剧的夏季高温更是对脱离水面的蛋鸭造成严重的热应激,导致繁殖性能下降。研究表明,家禽繁殖性能的下降与激素分泌水平有重要关
学位