【摘 要】
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新城疫病毒(NDV)具有诱生IFN、TNF、IL-2等多种细胞因子的作用,其包膜糖蛋白血凝素-神经氨酸酶,(HN)能够表达或粘附在肿瘤细胞膜上,大抗原提呈中起到了共刺激分子样的作用,经
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新城疫病毒(NDV)具有诱生IFN、TNF、IL-2等多种细胞因子的作用,其包膜糖蛋白血凝素-神经氨酸酶,(HN)能够表达或粘附在肿瘤细胞膜上,大抗原提呈中起到了共刺激分子样的作用,经动物实验及临床应用均证明可以增强特异生抗肿瘤免疫.鉴于此,该实验用FT-PCR的方法从NDV中获取HN cDNA,克隆了新城疫病毒HN基因并构建其真核表达重组质粒pcDNA3-HN;以同样的方法自病人手术切除结癌组织(CEA阳生)中取得编码癌胚抗原(CEA)的cDNA,构建其真核表达质粒pcDNA3-CEA.并以癌胚抗原(Garcinoembryonic antigen,CEA)为肿瘤抗原的代表,构建了HN基因与CEA cDNA的共表达质粒pcDNA3-CEA/HN.转染COS7细胞,了解构建的质粒的表达情况.结果表明:(1)该实验成功地构建了能在真核细胞表达的重组质粒pcDNA3-HN、pcDNA3-CEA、pcDNA3-CEA/HN.ELISA、血凝实验检测证明三种质粒在COS7细胞中能够良好地表达.(2)共表达质粒pcDNA3-CEA诱导的抗CEA免疫(SI、NK活性)强于单独接种pcDNA3-CEA或pcDNA3-HN、pcDNA3-CEA混合接种.(3)pcDNA3-HN作用在两种肿瘤模型显示,pcDNA3-HN具有抑制肿瘤生长的作用,尤其是接种15天后再荷瘤的小鼠,取得了理想的疗效,说明pcDNA3-HN具有免疫预防效应.从临床的角度,适合于手术切除后,残留癌细胞的消灭及转移的预防.检测在肿瘤免疫中起关键作用的CD4+细胞、CD8+细胞以及NK细胞的活性,结果表明pcDNA3-HN对它们的活性均有增强作用.
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