川芎美白活性成分的提取分离及在化妆品中的应用研究

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川芎(Rhizoma Chuanxiong)是伞形科植物川芎的干燥根茎,多年生草本植物,其具有活血化瘀、行气开郁、祛风止痛等功效。本文通过活性追踪法寻找川芎中抑制酪氨酸酶的活性成分,并将其应用于化妆品中,研制了具有美白功效的川芎膏,为其市场的开发提供一定的实验依据和理论基础。其主要研究内容和结果如下:1)抑制酪氨酸酶活性的条件确定。以熊果苷为研究对象,分别对磷酸盐缓冲液、底物L-酪氨酸、酪氨酸酶、恒温时间和反应时间进行单因素实验,考察其对抑制酪氨酸酶活性实验的影响,实验结果表明:磷酸盐缓冲液的pH值为6.8、L-酪氨酸的用量为1.0ml、酪氨酸酶的用量为1.0mL、水浴恒温时间为10min、反应时间为10min。2)筛选美白中药材。分别对麦冬、黄芪、川芎、益母草这四种中草药进行水煎煮和乙醇回流提取,测定其粗提取物的抑制酪氨酸酶活性和清除DPPH的作用,筛选具有美白及抗氧化功效的中药。实验结果表明:川芎的酪氨酸酶抑制率最高,优于中药麦冬、黄芪及益母草,且采用乙醇回流效果优于水煎煮;川芎和益母草具有优于麦冬和黄芪的清除DPPH作用,其抗氧化性较强;因此,开发川芎为潜在美白功效的中药材。3)川芎提取工艺优化。以酪氨酸酶活性抑制率为指标,采用单因素和正交实验结合的方法对川芎乙醇回流提取的提取方法进行优化,实验结果表明:川芎的最佳提取工艺为乙醇浓度为70%、提取时间为3h、料液比为1:10,提取次数为2次。4)川芎美白活性成分的分离。以酪氨酸酶活性抑制率为指标,分别采用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇四种不同极性对川芎提取物进行萃取,得到具有较好的抑制率为乙酸乙酯萃取部位;采用硅胶柱层析对乙酸乙酯部位进行分离,酪氨酸酶活性追踪的方法得到抑制率最强的Dc;对其进行薄层色谱鉴别和高效液相色谱检测,薄层色谱鉴别为单一斑点,高效液相色谱检测为单一峰,且与标准品对照,其美白活性成分为阿魏酸。5)川芎膏的研制。分别通过不同乳化剂复配及不同增稠剂复配的方法研制川芎膏,对其进行理化评价和感官评价,结果表明:选择Montanov202和SIMULSOL165这组乳化剂复配,羟乙基纤维素和Sepiplus400复配作为增稠体系。其既符合化妆品的使用品质,且稳定,适合川芎美白膏产品的开发。6)川芎膏的美白功效及安全性研究。研制含不同用量的川芎膏,分别对其进行稳定性、重金属含量测定、皮肤刺激性及美白功效评价,结果表明:重金属含量符合化妆品卫生学要求;经过3个月的稳定性实验,川芎活性物的稳定性用量范围为0.2%-1.0%;川芎活性物的膏霜的皮肤刺激性安全用量范围为0.2-1.5%;川芎活性物的膏霜美白功效用量范围为0.5%-1.5%;综合来看,川芎活性物用量范围为0.5%-1.0%所得川芎膏具有稳定性好、安全性高和良好的美白功效。
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