联苯菊酯的细胞毒性及杀虫活性的对映体选择性研究

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拟除虫菊酯类杀虫剂因高效、低毒、易生物降解等特性而比有机氯、有机磷类杀虫剂使用更为广泛。目前的研究已有很多报道关于拟除虫菊酯在急性水生生物毒性方面的对映体选择性,但对于哺乳动物细胞的毒性作用在对映体选择性差异方面的研究还鲜有报道。本文首先利用Chiralcel OJ-H手性液相色谱柱,实现了cis-BF两个(?)映异构体的正相高效液相色谱拆分,并通过6890N-气相色谱对1R-cis-BF及1S-cis-BF两个对映异构体进行了定量分析。本论文主要在对映体层面上研究了联苯菊酯(bifenthrin,BF)对人羊膜细胞(FL)的细胞毒性、遗传毒性及其对靶标生物菜青虫Pierisrapae L.的杀虫活性。结果显示:在以FL细胞为模型的一系列体外实验中,MTT法检测细胞生长活力表明当染毒浓度超过30mg/L时,根据FL细胞存活率判断联苯菊酯对FL细胞毒性强度依次为1S-cis-BF(55%)>Racemate(60%)>1R-cis-BF(82%)(p<0.05);活性氧(ROS)水平测定实验表明染毒后FL细胞ROS水平明显升高,其中1S-cis-BF染毒后FL细胞内ROS产生量与染毒浓度呈现一定的剂量效应关系,在最高染毒浓度20mg/L条件下,1S-cis-BF作用FL细胞后ROS产生量是1R-cis-BF的1.47倍之多(p<0.01);彗星实验表明染毒浓度为50mg/L的浓度组FL细胞DNA尾长的增加相比于对照组有显著性差异,其中1S-cis-BF处理的FL细胞DNA尾长是1R-cis-BF的3.4倍之多(p<0.01);荧光显微镜-鬼笔环肽染色法观察细胞骨架改变,FL细胞经50mg/L浓度的1S-cis-BF暴露24h后,细胞骨架破坏已经非常明显,胞内难见完整正常的F-actin纤维,而相同条件下1R-cis-BF暴露对FL细胞骨架几乎没有影响,结果表明1S-cis-BF暴露对FL细胞骨架损伤明显大于1R-cis-BF;流式细胞术实验表明染毒浓度为5和50mg/L的联苯菊酯作用于FL细胞后,凋亡发生率均升高,其中在50mg/L浓度组,1S-cis-BF诱导FL细胞的凋亡率是1R-cis-BF的3倍之多。而在以靶标生物菜青虫为模型的体内实验中,LC50实验表明1R-cis-BF的杀虫活性比1S-cis-BF强300倍以上。结合上述体内和体外实验,说明联苯菊酯对靶标生物菜青虫的活性及其对以FL细胞为模型的非靶标生物的细胞毒性在对映体选择性上的差异是相反的。本实验的研究结果提示在评价手性农药的环境安全性及研究更为安全有效的新型手性农药时都应当充分考虑其对映体选择性。
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