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研究背景类固醇激素受体的辅激活因子(steroid receptor coactivator SRC)作为一类转录的协同因子,能够和多种转录因子进行相互作用并且增强其转录活性。SRC-1隶属于SRC家族,现在已经有的研究结果显示SRC-1在体内可以具有多种生物学功能。SRC-1可以参与乳腺癌、前列腺癌和肝细胞癌等多种肿瘤的增殖和入侵。SRC-1在脑内突触的可塑性、神经干细胞的分化等过程中具有重要的调控作用。此外,SRC-1基因敲除可以削弱雌激素对血管损伤后的保护作用,从而加重血管损伤后的新生内膜的形成。尽管已有的研究结果表明SRC-1在心血管系统中内皮细胞、血管平滑肌细胞以及心肌细胞都有相应的表达,但是,到目前为止还不清楚SRC-1是否在Ang Ⅱ诱导的高血压血管重构中具有调控作用。高血压(Hypertension)是指以体循环动脉的血压升高为其主要特征(SBP≥140mmHg,DBP≥90mmHg),并且可以伴有心脏、脑、肾脏等器官损害的临床综合征。高血压后血管重构过程涉及了细胞的凋亡、血管管壁的炎症反应以及血管管壁的纤维化过程。如何调控高血压后血管重构是现阶段研究的热点。目的:进行探讨SRC-1基因在小鼠高血压病的血管重构作用研究方法:1.模型:按照实验动物的饲养要求来获得SPF级的C57BL雄性小鼠以及SRC-1基因敲除的小鼠,实验用小鼠控制在周龄8-10周,体重在18-20克,在无菌条件下,通过皮下埋置血管紧张素Ⅱ微量渗透泵的方法建立高血压模型。实验小鼠随机分为血管紧张素Ⅱ处理组和生理盐水处理组,每组小鼠各5只。2.使用软隆生物的BP98A测量仪器(即小鼠无创动脉血压测定仪)进行测定小鼠尾部的血压改变;石蜡切片后进行HE染色,并且观察各组小鼠的胸部主动脉的中膜厚度,管腔内经,从而计算血管管壁的中膜厚度与管腔内经的比值;石蜡切片后进行Masson染色,并且观察各组小鼠动脉血管的胶原含量变化;实时荧光定量的PCR法检测各组小鼠的血管组织中IL-1β、TNF-α mRNA的表达水平。结果:1.SRC-1基因敲除的鉴定结果。结果显示为:SRC-1--基因敲除(KO)的小鼠,只有一条为680 bp大小的条带;野生型(WT)的小鼠,只有一条为300 bp大小的条带;杂合型(SRC-1+/-)小鼠,包含两个条带,分别是680.bp的条带和300 bp的条带。2.使用血管紧张素Ⅱ诱导高血压模型成功后,采用小动物无创血压仪SoftronBP98A测定各组小鼠尾部动脉收缩压的变化,每只小鼠测量10次并且取其平均值。结果显示:使用生理盐水进行处理的两组小鼠之间的收缩压没有统计学差异;使用血管紧张素进行处理的两组小鼠之间的收缩压没有统计学差异;而血管紧张素Ⅱ组和生理盐水组两组之间的收缩压是有比较明显的差异性(P<0.001),其中使用血管紧张素Ⅱ进行处理后的两组收缩压是为(153.2±6.0mmHg;153.0 ± 9.OmmHg)使用生理盐水进行处理后的两组收缩压是为(113.7±3.0;113.7±8.5mmHg)。3.HE染色后,进观察并且测定各组小鼠胸部主动脉的中膜厚度、血管管腔内径,以及血管中膜厚度和血管管腔内径的比值。结果显示为:与WT+NS组比较,KO+NS组的小鼠胸主动脉的中膜厚度以及中膜厚度和管腔内径的比值没有统计学差异;与WT+AngⅡ组比较,KO+AngⅡ组的小鼠胸主动脉的中膜厚度以及中膜厚度和管腔内径的比值是升高的(p<0.01);与KO+NS组比较KO+AngⅡ组的小鼠胸主动脉的中膜厚度以及中膜厚度和管腔内径的比值也是明显的升高(p<0.01)。4.Masson染色后,观察并且测定各组小鼠血管胶原纤维含量的改变。结果显示:与WT+NS组比较,KO+NS组小鼠胸主动脉的胶原纤维含量无明显的统计学差异;与KO+NS组比较,KO+Ang Ⅱ组小鼠胸主动脉胶原纤维含量明显升高(p<0.01);与WT+AngⅡ组比较,KO+AngⅡ组小鼠胸主动脉的胶原纤维含量升高也是比较明显的(p<0.01)。5.实时荧光定量方法检测TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平。结果显示:与WT+NS组比较,KO+NS组小鼠胸主动脉中TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平无明显的统计学差异;与WT +Ang Ⅱ组比较,KO+Ang Ⅱ组的小鼠胸主动脉中的TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平明显升高(p<0.01);与KO +NS组比较,KO+Ang Ⅱ组的小鼠胸部主动脉中的TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平明显升高(p<0.01)。结论:1.SRC-1基因敲除在血管紧张素Ⅱ诱导的高血压血管重构过程中,可以加重高血压血管重构;2.SRC-1基因敲除在血管紧张素Ⅱ诱导的高血压血管重构过程中,可以上调TNF-α、IL-1 β的mRNA的表达水平。