【摘 要】
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近几十年来,肝脏疾病的发生率逐渐上升,成为世界上导致死亡的主要疾病之一。肝脏受损后会导致肝细胞的排毒能力大大降低,胆红素会在血液中大量积聚,引起高胆红素血症。另外肝病也会造成内毒素积累,引发内毒素血症,毒素通过血液流经全身,导致更严重的肝功能障碍甚至死亡。血液灌流是临床上最常用的肝病治疗手段,但是目前血液灌流材料大多只针对单一毒素的吸附,具有一定局限性。因此构建能够吸附多种毒素的功能吸附剂是一大热
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近几十年来,肝脏疾病的发生率逐渐上升,成为世界上导致死亡的主要疾病之一。肝脏受损后会导致肝细胞的排毒能力大大降低,胆红素会在血液中大量积聚,引起高胆红素血症。另外肝病也会造成内毒素积累,引发内毒素血症,毒素通过血液流经全身,导致更严重的肝功能障碍甚至死亡。血液灌流是临床上最常用的肝病治疗手段,但是目前血液灌流材料大多只针对单一毒素的吸附,具有一定局限性。因此构建能够吸附多种毒素的功能吸附剂是一大热点。本论文主要以对胆红素具有良好吸附效果的聚苯乙烯-二乙烯基苯高分子微球为载体,结合对内毒素具有强结合力的多粘菌素B,构建了一种能够同时高效吸附胆红素和内毒素的新型吸附材料。该材料具有优异的血液相容性和生物相容性,同时还能够通过孔径,疏水和静电相互作用实现对内毒素和胆红素的去除。首先本文通过巯基-烯点击反应在聚苯乙烯-二乙烯基苯微球表面接枝了分子臂,利用酰胺化法将多粘菌素B固定在微球表面,然后对微球的表面空隙结构、化学组成等进行表征,证明了多粘菌素B成功接枝到了微球表面。通过细胞毒性测定、蛋白吸附测定、溶血实验和凝血测试,本文证明了多粘菌素B功能化微球具有良好的生物相容性,溶血率低于5%,且对L929和HUVEC细胞无显著细胞毒性。本论文进一步研究了吸附材料对内毒素和胆红素的吸附效果,在体外模拟血浆对毒素的动态吸附实验中,发现改性后微球对胆红素的吸附率提高了17.03%,对于内毒素的吸附提高了42.75%,说明相比于原微球,改性后微球在保持了对胆红素的优异吸附能力之外,又增加了对内毒素的吸附能力。此外,为了研究不同位点氨基的多粘菌素B结合到载体表面与内毒素的亲和作用,本论文合成了巯基取代5种不同位点氨基的多粘菌素B,通过表面等离子共振技术,得出PMB1-PMB5解离平衡常数(KD),并发现1位点和2位点的氨基固定在表面时,多粘菌素B对内毒素表现出更加优异的亲和性,为设计具有高效吸附效果的多粘菌素功能化的吸附材料提供依据。以上工作可以很好地解决在肝脏疾病中引发的多种毒素积累问题,为血液灌流治疗肝病提供了新的思路和策略。
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