喉癌患者树突状细胞的体外培养和鉴定

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shem12god
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本研究的目的是体外分离培养喉鳞癌患者外周血来源的树突状细胞(DC),并与健康成人外周血来源的DC进行比较,为其作为瘤苗应用于喉癌的基因免疫治疗奠定基础。 方法:将实验对象分成两组,喉癌患者组和正常成人组。分别无菌条件下常规采集外周血20ml,淋巴细胞分离液密度梯度离心分离淋巴细胞,去除悬浮细胞后获得单核细胞。加入诱导因子GM-CSF、TNF-α、IL-4孵育十天收获DC,行透射电镜检查、流式细胞仪检测DC表面特殊表型CD1a及四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其对同种异体T淋巴细胞的刺激增殖作用。 结果:在GM-CSF、TNF-α、IL-4三种因子的诱导下喉癌患者外周血来源的单核细胞能分化为成熟的DC。光镜及电镜下观察具有典型的DC的形态特征。产量可达1~4×106/20ml,表面高表达DC的特征性表面分子CD1a为(75.0±5.67)%,少量DC即可激发强烈的T淋巴细胞增殖作用,且DC:T为1:5时刺激作用最强SI=26.16±1.38。上述各项指标均与正常人无明显差别(P>0.05)。 结论:喉癌患者外周血单核细胞可在体外诱导因子作用下分化成为足够治疗量并且功能成熟的DC,具有刺激淋巴细胞增殖的作用,为其日后作瘤苗应用于喉癌的基因免疫治疗奠定了基础。
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