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目的:1.建立新生大鼠高氧肺损伤的动物模型;2.观察与比较高氧性损伤时新生大鼠肺组织的病理组织学改变,以及肺表面活性物质相关蛋白-A(pulmonary surfactant protein-A,SP-A)的mRNA及其蛋白的表达变化,从而探讨SP-A在新生大鼠高氧肺损伤发生、发展中可能的作用;3.探讨吸入性糖皮质激素布地奈德(budesonide,BUD)是否通过调控SP-A的表达从而发挥对高氧肺损伤的保护作用,为临床防治高氧肺损伤提供理论依据。方法:取108只出生1天内的新生Sprague Dawley(SD)大鼠(雌雄不限)随机分成三组:即Ⅰ组:空气组(对照组),Ⅱ组:高氧+生理盐水组(高氧组),Ⅲ组:高氧+布地奈德组(干预组),每组36只。Ⅰ组置于空气中;将Ⅱ、Ⅲ组实验动物持续暴露于90%~95%氧箱中,直至实验结束。Ⅱ组于每日雾化吸入NS10ml,Ⅲ组每日同一时间点吸入溶解BUD的等量的NS(含BUD2mg)。设立实验后3、7和14天3个时间观测点,处死动物,行支气管肺泡灌洗,测定灌洗液中蛋白含量;取肺组织,计算肺湿/干重比;HE染色观察组织病理学变化;Westen Blot方法检测SP-A蛋白含量、RT-PCR方法检测SP-A mRNA表达水平。结果:1.各组实验动物一般情况:Ⅰ组(空气组)中的实验动物在实验期间精神状态佳、活动灵活,进食正常。Ⅱ组(高氧组)中的实验动物逐渐出现症状,表现皮毛无光泽、精神萎靡、活动少,脱氧后烦躁不安,呼吸困难明显,鼻尖发绀,恢复供氧可逐渐缓解;Ⅲ组(干预组)中的实验动物情况介于前两者之间。2.肺组织病理切片:Ⅰ组(空气组)实验动物肺组织病理切片见肺组织结构规整,无炎症反应,肺泡大小、形态均一;Ⅱ组(高氧组)高氧暴露3d后可见肺血管扩张充血,肺泡腔内出现红细胞及炎性细胞,肺间隔断裂,肺泡腔扩大;高氧7天时,炎性渗出、肺水肿、肺出血较前更加明显,部分肺间隔增宽变形,肺组织结构紊乱;14天时更为明显,肺组织结构紊乱,肺间隔重度增厚,出现明显纤维化改变,肺泡发育受阻,肺泡数量明显减少、大小不一,肺泡腔明显增大,部分肺泡融合,可见肺大泡或肺不张。Ⅲ组(干预组)肺组织形态与结构改变较II组有明显减轻。3.肺组织湿/干重比值(W/D):实验3天、7天时,Ⅱ组(高氧组)实验动物肺组织湿/干重比值(W/D)较Ⅰ组(空气组)增高(P<0.01),实验14天时,Ⅱ组较Ⅰ组升高更明显(P<0.01),而Ⅲ组(干预组)与Ⅱ组相比,3天、7天、14天的比值均有明显下降(P<0.01)。4.支气管肺泡灌洗液(BLAF)中蛋白含量(TP)测定:实验3天、7天和14天时Ⅱ组(高氧组)BLAF中TP均高于Ⅰ组(空气组),差异有显著性意义(P<0.01);Ⅲ组3天时BLAF中TP较II组降低(P<0.05),7天、14天时明显降低(P<0.01)。5.肺组织中SP-A蛋白表达水平的变化:Westen Blot检查测定结果表明:与I组动物比较,II组(高氧组)实验3天时SP-A蛋白表达明显增高(P<0.01);7天、14天SP-A蛋白表达下降,14天时下降更明显(P<0.01)。Ⅲ组(干预组)实验3天时SP-A蛋白表达介于I组与II组之间(P<0.05),7天、14天SP-A蛋白的表达均较高氧组组显著升高(P<0.05)。6.肺组织中SP-A mRNA表达水平的变化:RT-PCR检查测定结果表明:与I组动物比较,II组实验3天时SP-A mRNA表达水平明显增高,差异有显著性意义(P<0.05);7天时可见表达下降,14天时下降更明显(P<0.01)。III组的SP-A mRNA表达水平接近于I组SP-A mRNA的表达趋势;实验3天时SP-A mRNA表达水平介于I组与II组之间,与II组比较有显著性意义(P<0.05);7天、14天时表达水平较II组显著升高(P<0.05)。结论:1.高氧对新生大鼠肺组织有损伤作用,并随吸氧时间的延长而加重。主要病理变化为肺组织局部水肿和出血、炎症渗出、结构组织紊乱、肺泡发育障碍、肺泡数目减少和肺间质纤维化。2.高氧性肺损伤时,SP-A的mRNA和蛋白在肺组织中的表达规律呈现先增高后降低的趋势,随着高氧暴露时间的延长与肺损伤程度相平行,提示高氧肺损伤发生过程中机体具有一定的自我保护机制,而肺表面活性物质相关蛋白分泌减少或功能缺陷,是高氧肺损伤的重要因素。3.吸入糖皮质激素布地奈德可能通过抗氧化、减轻炎症反应,进而上调SP-A的mRNA和蛋白的表达与活化,从而减轻肺损伤,对高氧肺损伤的发生具有一定保护作用。