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第一部分雷珠单抗对大鼠角膜新生血管microRNAs的影响及意义目的探讨雷珠单抗注射液对大鼠角膜新生血管治疗效果,寻找治疗前后差异表达miRNA,为角膜新生血管治疗提供新的方向。方法24只SPF级大鼠以随机数表法分为3组:空白组8只（A组）。以左眼为实验眼,缝线法建立大鼠角膜新生血管模型后分为模型组（B组）和结膜下注射雷珠单抗治疗组（C组）。术后第8天随机抽取各组6只大鼠测量角膜新生血管长度及面积。行组织病理学检查及免疫荧光染色法检测CD31的表达。结合基因芯片与生物信息学数据库,选择与新生血管相关的miRNAs,实时荧光定量PCR验证各组的miRNAs及VEGF-A表达的差异。生物信息学方法分析差异miRNA的靶基因。结果术后第8天,C组角膜新生血管长度、面积较B组减少（P<0.01）。组织病理学检查示B组角膜组织中新生血管形成及大量炎症细胞浸润,C组仅有少量新生血管及炎症细胞。免疫荧光检查示A组角膜组织未见CD31信号,C组CD31荧光信号弱于B组,B组CD31染色阳性的微血管数为（9.83±1.85）个/400×视野;C组中CD31染色阳性的微血管数为（4.58±1.38）个/400×视野。三组血管数量有统计学差异（F=163.654,P<0.01）。C组中VEGF-AmRNA表达水平较B组下调,miR-15b、miR-16、miR-29c表达水平较B组上调（为P<0.01）。差异miRNAs的靶基因主要富集于血管生成、蛋白结合等条目。结论结膜下注射雷珠单抗能减少大鼠角膜新生血管的形成,降低VEGF-A及改变相关miRNAs的水平,可能存在通过调控miRNAs的表达来影响调控血管新生的机制。第二部分 mmucirc0001052在小鼠角膜新生血管表达及相关性分析目的探讨mmucirc0001052及MMP16在碱烧伤诱导的小鼠角膜新生血管的表达及与相关性分析关系,为角膜新生血管诊断和治疗提供新思路。方法用碱烧伤法建立小鼠角膜新生血管模型,在circBase数据库搜索mmucirc0001052序列完全互补配对的miRNA及Targetscan数据库搜miRNA下游互补配对的靶基因。实时定量PCR（qRT-PCR）检测mmucirc0001052、miR-184、MMP16的表达。Spearman法分析mmucirc0001052与靶miRNA、下游mRNA的相关性。免疫组化检测MMP16的表达。结果造模后第2-4天小鼠角膜角膜缘全周血管变粗,部分向中心发芽;第7天-14天时新生血管粗大、密集,大部分交汇成网状;21天后角膜新生血管逐渐消退。PCR结果示碱烧伤后各时间点与空白组相比,角膜组织中mmucirc0001052在碱烧伤后第7、14、21天较空白组升高,在14天达到顶峰,差异具有统计学意义（P<0.01）;MMP16的mRNA的相对表达量碱烧伤后各时间点均呈现上调,在第14天时达到高峰;miR-184各时间点均呈现下调,在第7天表达量最低,miR-184mRNA相对表达量在不同时间点上的变化差异均具有统计学意义（P<0.01）。角膜组织HE染色下观察到正常小鼠角膜组织上皮及内皮层完整,各层结构清楚。碱烧伤后第4、7、14、21天角膜上皮层水肿,基质内出现新生血管,内含大量红细胞。其中第14天炎性细胞及血管最多,第21天呈减少趋势。免疫组化检查示:空白组小鼠角膜中MMP-16未见表达,碱烧伤组各时间点角膜组织中MMP16蛋白表达呈棕褐色,MMP16蛋白表达上调。与空白组相比,角膜组织中mmucirc0001052与MMP16的表达量呈正相关,与miR-184呈负相关。结论mmucirc0001052及MMP16可能在小鼠角膜新生血管的发生发展中起作用,其机制可能为mmucirc0001052升高加强了miR-184表达抑制从而促进MMP16的表达有关。