粪肠球菌试验性感染小鼠的研究

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粪肠球菌是人类和动物肠道正常菌群的成员,通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌中发现,以往认为粪肠球菌是对人类无害的共栖菌,但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰氏阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要医院内感染致病菌。粪肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。本研究利用实验室分离并经鉴定的动物源粪肠球菌进行致病性试验.用从致羔羊脑炎的羊脑组织中分离的粪肠球菌通过腹腔、鼻腔及眼部粘膜、尾静脉途径,以200万—200亿个活菌数的梯度接种剂量接种小鼠,试验表明,腹腔接种途径是最易造成小鼠发病与死亡的感染途径。经过重复试验测得实验用菌株对小鼠的半数致死量为9.3×1010亿。以100亿个活菌腹腔接种小鼠4h后可从肝、脾中分离出,6h后可从肝、脾、心中分离来,12h后,肠球菌就可从小鼠的心脏、肝脏、脾脏及脑组织中分离出,如果小鼠不发生死亡,细菌可在心、肝、脾、脑中存在四天。一周后脑组织和脾脏中该菌的检出率相对高,但从心脏和肝脏就几乎分离不到该菌。细菌可在感染小鼠的脑部长期存在。剖解涉临死亡小鼠的内脏器官如心、肝、脾、肺、肾和脑组织通过病理组织切片观察可见明显的病变。以100亿个活菌腹腔接种24h后,剖解取小鼠的心、肝、脾、肺、肾和脑组织做透射电镜切片,可观察到各组织器官的超微结构发生了明显的病变。由于缺血、缺氧造成的生物膜的损伤是粪肠球菌致病机制中最重要的原因。对感染未死亡小鼠,用凝集法测抗体的产生和效价。结果四个不同剂量感染小鼠后5天即可产生抗体,抗体滴度为1:160。两周后抗体滴度可达峰值1:483,此后逐渐下降。四周后,抗体滴度降为1:149。四组不同感染剂量的小鼠的抗体消长无明显差异。本研究通过建立肠球菌感染小鼠模型,探索肠球菌在感染小鼠体内的扩散时间和分布,以及各器官组织病理学变化规律,为研究肠球菌的致病机制、建立病原学、病理学及免疫学诊断方法提供科学依据,并为临床早期治疗提供指导。
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